[發(fā)明專(zhuān)利]利用微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)天然香料γ-十二內(nèi)酯的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910065540.7
• 申請(qǐng)日: 2009-07-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101967503A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-02-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李恒
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河南省南召縣華龍辛夷開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P17/04
• 分類(lèi)號(hào): C12P17/04;C12R1/645;C12R1/73;C12R1/84
• 代理公司: 鄭州紅元帥專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 41117
• 代理人: 莊振乾

1.一種利用微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)天然香料γ-十二內(nèi)酯的方法，其特征在于按下述步驟制備：

(1)初篩：選擇能夠利用硬脂酸作為能源并以油酸為底物的目標(biāo)微生物；

(2)復(fù)篩：選擇合適的培養(yǎng)基配方將初篩得到的菌株進(jìn)行復(fù)篩，得到生長(zhǎng)旺盛的復(fù)篩菌株，目的為保證微生物轉(zhuǎn)化過(guò)程中不以消耗油酸作為能量來(lái)源，進(jìn)而按照上述培養(yǎng)基配方加入油酸取代硬脂酸恒溫振蕩培養(yǎng)，反應(yīng)后去除有機(jī)溶劑進(jìn)行氣相色譜分析后選取10-羥基脂肪酸產(chǎn)率高的菌株進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)；

(3)第一步發(fā)酵：選取合適的培養(yǎng)基配方，在一定溫度、時(shí)間下?lián)u床培養(yǎng)，加入底物后繼續(xù)培養(yǎng)若干時(shí)間之后完成發(fā)酵過(guò)程，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行酸化處理并除去有機(jī)溶劑后進(jìn)行氣相色譜鑒定，上述菌株能將油酸轉(zhuǎn)化為兩種混合物，為10-羥基脂肪酸和10-羰基硬脂酸；

(4)第二步發(fā)酵：10-羥基硬脂酸轉(zhuǎn)化為γ-十二內(nèi)酯，反應(yīng)體系加入吐溫80作為為表面活性劑提高菌種作用活性，在第一步實(shí)驗(yàn)粗提的10-羥基硬脂酸中接種焙烤酵母，為增加反應(yīng)體系的互溶性加入石蠟起到增溶作用，通過(guò)蒸餾將產(chǎn)品從石蠟中純化，純度可達(dá)97.9％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)天然香料γ-十二內(nèi)酯的方法，其特征在于：所述酵母可以是畢赤酵母或耶羅威亞酵母或Candida?lipolytica。