[發明專利]小鼠FcγRⅢ線性配體結合表位

無效

• 申請號: 200910065039.0
• 申請日: 2009-05-27
• 公開（公告）號: CN101565456A
• 公開（公告）日: 2009-10-28
• 發明（設計）人: 張改平;張利娜;席俊;郭軍慶;苗現偉;趙東;喬松林;楊艷艷;郅玉寶;劉運超;王方雨;王麗;鄧瑞廣
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12N15/12
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司
• 代理人: 張愛軍

一.技術領域：

本發明涉及分子生物學、免疫學和生物信息學領域，特別是涉及小鼠FcγRIII(Fc?GammaReceptor?III)線性配體結合表位多肽。?

二.背景技術：

Fc受體(FcR)為特異親和免疫球蛋白(Ig)Fc片段的細胞表面分子，小鼠FcγR有四種類型，分別為FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)、FcγRIII(CD16)和FcγRIV，其胞外區結構相似，均含有兩個(FcγRII和FcγRIII)或三個(FcγRI)Ig樣結構域，屬Ig超基因家族，而跨膜區和胞內區則存在明顯差異。FcγRIII是高度糖基化膜蛋白，為中低親和力IgG受體，在生理條件下只能結合IgG復合物或多聚體。moFcγRIII胞內區與FcR?γ鏈二聚體、T細胞受體(T?cell?receptor，TCR)ζ鏈二聚體或FcRγ鏈-TCRζ鏈異源二聚體相連，通過這些亞基的ITAM基序進行信號轉導，FcRγ鏈或TCRζ鏈為FcγRIII在細胞表面表達所必需，只有通過共轉染FcR?γ鏈或TCRζ鏈，才能在細胞表面表達FcγRIII。γ-chain具有信號傳導功能，通過二硫鍵與FcγRIII結合，介導FcγRIII的表達。?

Fc受體廣泛表達于免疫輔助細胞和效應細胞，具有許多重要的生理功能，是體液免疫與細胞免疫的聯系紐帶，在機體免疫調節中起關鍵作用。抗體介導的炎性反應可通過激活型和抑制型FcR進行調節，因此FcR是治療過敏和自身免疫性疾病理想的藥物靶標。根據FcγR功能的不同，提高或降低FcγR-IgG結合的親和力可以達到相應的FcγR免疫治療目的。激活型受體的胞內區(FcγRIIA)或者FcR?γ鏈(FcγRI、FcγRIII、boFcγ2R、moFcγRIV、FcαRI和FcεRI)含有基于酪氨酸的受體活化基序(immunoreceptor?tyrosine-based?activation?motif，ITAM)，能激活免疫效應細胞，誘導吞噬作用(phagocytosis)、抗體依賴細胞毒作用(antibody-dependentcellular?cytotoxicity，ADCC)、補體依賴細胞毒作用(complement-dependent?cellularcytotoxicity，CDCC)、細胞裂解(cytolysis)、分泌細胞因子和其它炎性因子以及調節淋巴細胞增殖和分化等多種免疫學效應。可溶性FcγR重組蛋白在體外可阻斷免疫復合物與B細胞的結合，因此在體內可與免疫細胞表面FcγR競爭結合IgG，抑制免疫復合物對細胞的激活；同理，?高劑量的非特異IgG也可與體內免疫復合物競爭結合表達FcγR的免疫細胞，靜脈內免疫球蛋白治療方法(intravenous?immunoglobulin?therapy，IVIG)已應用于血小板減少(immunethrombocytopenic?purpuria，ITP)、全身性紅斑狼瘡(systemic?lupus?erythematodes，SLE)和多組織硬化(multiple?sclerosis，MS)等疾病的免疫治療。IgG?Fc-FcγRIII晶體結構的解析以及對信號轉導機制的了解為發現新的特異、高效藥靶提供了更多的信息和途徑，人們利用肽庫篩選、組合化學(combinatorial?chemistry)、生物信息學以及合成多肽等篩選和鑒定了多種IgG?Fc片段的抑制性多肽，其中抑制Fc-FcγR結合的TG19320三肽四聚體在小鼠體內顯現對腎小球腎炎良好的抑制功效。Medgyesi等在人IgG1Fc片段中鑒定了誘導細胞信號傳導的功能性多肽，來源于CH2區Pro234-Ser298的多肽與細胞表面FcγRIIB特異結合，可誘導細胞分泌細胞因子和ERK的磷酸化，并能抑制BCR介導的Ca²⁺反應。然而，小分子多肽對受體的親和力遠遠低于完整的抗體分子，多肽親和力的提高等問題尚有待解決。?

三.發明內容：

本發明要解決的主要技術問題是：提供一種小鼠FcγRIII線性配體結合表位多肽，為鑒定本發明的多肽在體外的抑制活性，分別進行了多肽對小鼠IgG-可溶性受體結合的抑制和小鼠IgG-細胞表面受體結合的抑制，表明線性表位多肽對小鼠FcγRIII親和小鼠IgG顯現出良好的抑制功效。?

本發明的技術方案是：?