[發明專利]當歸補血口服液中黃芪甲苷含量的測定方法

有效

• 申請號: 200910064944.4
• 申請日: 2009-05-18
• 公開（公告）號: CN101551365A
• 公開（公告）日: 2009-10-07
• 發明（設計）人: 李建中
• 申請（專利權）人: 鄭州市協和制藥廠
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所（普通合伙）
• 代理人: 王 霞

技術領域

本發明涉及中藥制劑中有效成份的測定方法，尤其是涉及一種當歸補 血口服液中黃芪甲苷的測定方法。

背景技術

當歸補血口服液是由鄭州市協和制藥廠生產的成方制劑，為國內首創 的治療性補氣、補血四類新藥，經國家中藥保護委員會批準為國家中藥保護 品種，全國獨家生產。該口服液補氣養血，適用于氣血兩虛癥。用于營養不 良、脾胃虛弱引起的貧血癥及婦科疾病引起的貧血癥；同時還具有美容駐顏 之功效。由于當歸補血口服液為液體制劑，藥物吸收快，作用迅速，服用 方便。

當歸補血口服液中黃芪為主藥，且用量最大，起主要作用，黃芪是傳統 中藥，為補氣藥，性甘溫，歸肺脾經，具有補氣固表，利尿托毒，排膿，斂 瘡生肌之功效。現代研究表明黃芪含有多種化學成分，如皂苷類，黃酮類， 木脂素類，氨基酸類，多糖類及多種微量元素等。其所含的三萜皂苷類化 合物-黃芪甲苷，是黃芪的主要的有效成分，也是當歸補血口服液的主要有 效成分。因此，作為當歸補血口服液的質量標準評價手段，，黃芪甲苷含量 測定的準確與是保證產品療效的技術關鍵。

常規測定制劑中黃芪甲苷含量的方法主要有兩種方法：高效液相色譜- 紫外檢測法和薄層色譜掃描法。高效液相-紫外檢測法測定黃芪甲苷含量， 系統平衡慢(1-2小時)，基線不穩定，再加上黃芪甲苷無共軛體系，僅在 200nm左右有弱的紫外末端吸收，則色譜峰的響應值較底；又紫外末端吸 收易受影響，尤其是受溶劑吸收的干擾大，噪音對結果的影響也較大，噪音 大時，檢測限也較大，那么低于此檢測限的組分峰將被噪音所淹沒，而監 測不出來。由此可知，當樣品中黃芪甲苷含量較低時，此法很難準確測定。 為此，對黃芪甲苷的含量測定一般采用薄層色譜掃描法。但薄層色譜掃描 法操作較繁瑣，且受影響因素較多，如薄層層析時，展開溫度，展開系統 的飽和性，所用硅膠板顆粒的大小，硅膠板的緊密性等都會影響黃芪甲苷 的含量測定，雖然用了共薄層的方法消除了部分誤差，但各次實驗間的重 現性較差；為了排除其它成分的干擾和背景的干擾，須經過多步分離純化， 而且在純化過程中黃芪甲苷的損失也較多。

近年來，有用蒸發光散射檢測器測定黃芪甲苷含量的報道，蒸發光散射 檢測器是一種通用的質量型監測器，能檢測到半揮發或不揮發性分子中無 紫外吸收的化合物；所得到的色譜圖基線平穩，峰形良好，可達到基線分 離；靈敏度、穩定性及重現性亦能符合含量測定的要求，且操作簡便，是 一種檢測黃芪甲苷成分的新型有效的分析方法。與高效液相-紫外檢測法相 比，高效液相-蒸發光散射檢法主要用于測定無紫外吸收的化合物，因其在 測定有紫外吸收的組分時，靈敏度比紫外檢測器要低。

當歸補血口服液原質量標準采用薄層色譜掃描法，實驗過程中發現， 薄層色譜掃描法受外部環境干擾較大，實驗結果重現形較差，且分離純化 復雜。由于當歸補血口服液的中黃芪甲苷已存在于液體樣品，對其進行測 定不同于生藥及其制劑，按常規方法直接改用高效液相-蒸發光散射檢測 法，樣品經過正丁醇提取-氨試液洗滌，進樣，結果表明色譜雜質峰較多， 峰形不對稱，分離的重現性較差。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用高效液相-蒸發光散射檢測器準確檢測當 歸補血口服液中黃芪甲苷含量的測定方法。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的當歸補血口服液中黃芪甲苷含量的測定方法，其具體步驟 為：

(一)確定色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 36∶64為流動相；柱溫：室溫；流速：1.0mL/min。蒸發光散射檢測器條 件：漂移管溫度：35℃～45℃，載氣流速2.7L/min，載氣壓力3.1Bar；

(二)對照品溶液的制備：稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每 1ml溶液中含黃芪甲苷0。4mg的溶液備用；

(三)供試品溶液的制備：量取待測品10ml，置分液漏斗中，加水飽 和正丁醇提取4次，每次振搖200～250次，正丁醇用量每次20ml，合 并四次正丁醇提取液；用氨試液將上述所得的正丁醇提取液洗滌兩次， 每次取氨試液20ml，第一次氨試液洗滌待完全分層后，棄去氨液；第二 次氨試液洗滌時需靜置2～4小時，再棄去氨液；取所得正丁醇提取液， 蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即 得供試品溶液；