[發明專利]用于小麥白粉病抗病基因PmHNK輔助選擇的分子標記及其用法有效
| 申請號： | 200910064324.0 | 申請日： | 2009-03-04 |
| 公開（公告）號： | CN101532054A | 公開（公告）日： | 2009-09-16 |
| 發明（設計）人： | 許為鋼;李春鑫;張建周;胡琳 | 申請（專利權）人： | 河南省農業科學院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 鄭州大通專利商標代理有限公司 | 代理人： | 張愛軍 |
| 地址： | 450002河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 小麥 白粉病 抗病 基因 pmhnk 輔助 選擇 分子 標記 及其 用法 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于小麥白粉病抗病基因PmHNK輔助選擇的分子標記的用法，其特 征在于：
所述分子標記為與小麥白粉病抗性基因PmHNK的遺傳距離為5.3cM的標記 xgwm299，擴增該分子標記的引物的核苷酸序列如下：
P1：5’-ACTACTTAGGCCTCCCGCC-3’，
P2：5’-TGACCCACTTGCAATTCATC-3’；
將所述分子標記用于SSR標記篩選時的反應程序為：
(1)PCR反應體系為10μL，含10×buffer?1μL、15mmol/L?MgCl2?1μL、2 mmol/L?dNTP?1μL、20ng/μL分子標記引物1μL、1U?Taq酶、去離子水3.875 μL、20ng/μL基因組DNA?2μL；
(2)擴增程序為：94℃預變性3min；94℃變性1min，55℃退火1min， 72℃延伸2min，40個循環；72℃延伸10min；
(3)擴增產物用6％變性聚丙烯酰胺凝膠或8％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳， 硝酸銀染色后觀察照相。
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