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[發明專利]豬胚胎的移植器械及其移植方法無效

專利信息
申請號: 200910063747.0 申請日: 2009-08-28
公開(公告)號: CN101642389A 公開(公告)日: 2010-02-10
發明(設計)人: 魏慶信;鄭新民;李莉;肖紅衛;王亞剛 申請(專利權)人: 湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所
主分類號: A61D19/04 分類號: A61D19/04
代理公司: 武漢帥丞知識產權代理有限公司 代理人: 朱必武
地址: 430064湖北省*** 國省代碼: 湖北;42
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摘要:
搜索關鍵詞: 胚胎 移植 器械 及其 方法
【說明書】:

技術領域

本發明涉及一種豬胚胎的移植器械及其移植方法,屬于胚胎移植領域。

背景技術

豬胚胎移植試驗成功最早于1951年由Kvashickii報道。到20世紀60年代,已經基本建立了外科手術方法采集和移植胚胎的技術。到70年代以后,北美和歐洲開始將胚胎移植技術應用于向閉鎖豬群引進外血和國際間的引種。80年代轉基因動物技術的出現,促進了胚胎移植技術的應用和發展。1985年Hammer等人,首先將人生長激素基因應用顯微注射技術注入豬的受精卵,然后應用胚胎移植技術將其移入受體母豬的輸卵管,得到轉基因豬。這之后,國際上各種轉基因的胚胎,包括用顯微注射法、精子介導法、體細胞核移植法和其它方法獲得的轉基因胚胎,通過胚胎移植技術生產出轉基因豬;各種胚胎工程獲得的胚胎,如體外受精的胚胎、胚胎細胞核移植和體細胞核移植的重構胚胎,通過胚胎移植技術獲得“試管豬”和“克隆豬”。

我國最早建立豬胚胎移植技術的是湖北省農科院魏慶信等人,1989年他們將豬的囊胚期胚胎移入受體母豬的子宮角,得到胚胎移植的后代;1992年,將體外受精的胚胎,移植到母豬的輸卵管,得到“試管豬”;1997年,將胚胎細胞核移植的重構胚胎,移植到母豬的輸卵管,得到“克隆豬”;先后將七種外源基因導入豬的受精卵,通過胚胎移植技術得到了相應整合并表達的轉基因豬。中國農科院畜牧研究所馮書堂等人,于1990年建立了豬的胚胎移植技術,并得到胚胎移植的仔豬。進入21世紀以來,中國農業大學、東北農業大學、上海農科院畜牧獸醫研究所等單位,先后應用胚胎移植技術,將克隆胚胎或轉基因的胚胎移入母豬的生殖道,獲得克隆豬或轉基因豬。

國內外豬胚胎移植已有技術的特征是:進行輸卵管移植時,用移卵管直接從輸卵管傘部插入輸卵管;進行子宮角移植時,用移卵管直接插入子宮角。該技術的缺陷有三點:

1、移卵管難以插入較深的部位,尤其是進行輸卵管移植時,很難插入輸卵管的壺腹部,至使胚胎不能移到最合適的部位,從而影響胚胎移植的成功率。

2、移卵管直接從輸卵管傘部插入輸卵管,或直接插入子宮角,在插入的過程中,由于輸卵管內膜或子宮角內膜上粘液的吸附作用,很容易造成胚胎的丟失,從而影響胚胎移植的效率。

3、移卵管直接從輸卵管傘部插入輸卵管,或直接插入子宮角,在操作的過程中稍有不慎,或受體母豬稍有騷動,由于移卵管為玻璃質地,很容易折斷或破碎,從而造成移植失敗,嚴重的還會造成受體母豬生殖道的損傷。

專利CN200520103507.6涉及的是人的胚胎移植,CN200510105236.2涉及的是牛的胚胎移植,但是它們均為非手術移植,其中的外套管只是用來保護其內芯。同時由于各種動物生殖道的形態結構不相同,胚胎移植所用的器械和方法也不相同,如果應用以上兩篇專利的技術方案不能進行豬的胚胎移植,也就不能克服已有豬胚胎移植技術的三點缺陷。

發明內容

本發明的目的在于提供一種豬胚胎的移植器械及其移植方法,為手術移植,有效地克服了已有豬胚胎移植技術的三點缺陷,大大提高了胚胎移植的成功率,操作方便。

豬胚胎的移植器械,包括移卵管,其特征在于:還包括輸卵管移植用外套管或子宮角移植用外套管,移卵管在各外套管內部;輸卵管移植用外套管是長65-70mm、管腔直徑3-4mm、管壁厚0.1-0.2mm的硬質、有彈性的塑料細管,兩端磨平滑;子宮角移植用外套管是長65-70mm、管腔直徑3-4mm、管壁厚0.1-0.2mm的硬質、有彈性的塑料細管,其一端剪成15°-20°斜面,另一端磨平滑。

豬胚胎的移植方法,受體母豬麻醉保定后手術切口,將輸卵管和卵巢引出切口之外或將子宮角引出切口之外;其特征在于:(1)輸卵管移植方法步驟如下:先將輸卵管移植用外套管從輸卵管傘口插入輸卵管,用手將輸卵管沿外套管向前捋,直至壺腹部;然后將吸有胚胎的移卵管插入外套管,直至用手能感覺到移卵管已穿過外套管,再將外套管退出1-2公分;最后將移卵管內的胚胎和培養液移入輸卵管內;移植完畢,小心將移卵管和外套管退出,復原輸卵管傘,按常規縫合創口;(2)子宮角移植方法步驟如下:先將子宮角移植用外套管15°-20°斜面端從子宮角的合適部位避開血管插入子宮角內腔,外套管進入子宮角內腔的深度4-5公分,用手感確認外套管在子宮腔內;然后將吸有胚胎的移卵管插入外套管,直至用手能感覺到移卵管已穿過外套管0.5-1公分;最后將移卵管內的胚胎和培養液移入子宮角內;移植完畢,小心將移卵管和外套管退出,復原子宮角,按常規縫合創口。

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