[發(fā)明專利]放射線敏感性腫瘤靶向啟動子及用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910061396.X
• 申請日: 2009-04-03
• 公開（公告）號: CN101508989A
• 公開（公告）日: 2009-08-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周云峰;廖正凱;周福祥;謝叢華;熊杰;孫文潔
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢大學(xué)
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所
• 代理人: 王敏鋒

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種放射線敏感性腫瘤靶向啟動子，即對腫瘤靶向性端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因啟動子進行修飾而得到修飾的啟動子，還涉及利用該修飾了的啟動子調(diào)控辣根過氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)自殺基因系統(tǒng)在破壞和抑制宮頸癌、肺癌、肝癌細(xì)胞生長的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

縱觀國內(nèi)外的疾病譜變化模式，惡性腫瘤已成為嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病。隨著分子生物學(xué)的進步，基因治療為戰(zhàn)勝腫瘤帶來了希望。各國在惡性腫瘤基因治療方面開展了大量研究并取得了一定成果，部分基因治療方案已經(jīng)用于臨床，從安全性考慮，可以說適于腫瘤治療。例如，中國擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的重組人p53腺病毒注射液已獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的新藥證書，用于治療頭頸部癌癥和胃癌等惡性腫瘤。

基因治療的關(guān)鍵是靶向性問題，也就是把治療效應(yīng)限定在特定的靶細(xì)胞、靶組織或靶器官內(nèi)，既達到治療作用又不影響正常細(xì)胞和組織。外源調(diào)控在基因治療中尤為重要。為了能特異而有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，需要建立一種特異性高、活性強的啟動子，來控制下游目的基因的表達。

啟動子是基因的組成部分之一，控制基因表達(轉(zhuǎn)錄)的起始時間和表達的程度。基因治療中，基因表達載體(質(zhì)粒、病毒載體等)通過啟動子調(diào)控其下游治療基因的表達，達到特定的治療目的。腫瘤特異性啟動子能夠調(diào)控治療基因只在腫瘤細(xì)胞中表達，從而降低對正常細(xì)胞的損傷。通過腫瘤特異性啟動子調(diào)控目的基因的表達被廣泛地運用于腫瘤靶向基因治療的研究中，這種方法遇到的困難在于，1.絕大多數(shù)選擇性啟動子只針對特殊的組織來源，而沒有能夠適用于不同組織來源的啟動子；2.絕大多數(shù)選擇性啟動子啟動效力較弱，很難達到治療水平的轉(zhuǎn)基因表達。到目前為止，幾乎沒有既有高特異性，又有高活性的腫瘤特異性啟動子，這直接阻礙了基因治療的發(fā)展。目前，hTERT基因啟動子已被大多數(shù)學(xué)者公認(rèn)為是針對惡性腫瘤普遍性較好的腫瘤特異性啟動子，是較有希望應(yīng)用于腫瘤靶向基因治療的啟動子。提高基因治療中hTERT啟動子活性，將有助于下游治療基因的表達、提高療效，這一點我們在治療過程中應(yīng)當(dāng)重點考慮。

端粒酶是一種核糖核蛋白復(fù)合物，能夠維持染色體末端的端粒長度。端粒酶在超過85％的人類惡性腫瘤細(xì)胞中具有高活性，而在正常組織(除生殖細(xì)胞和有高度復(fù)制潛能的體細(xì)胞)中被抑制或不表達(見參考文獻：Shay?JW，BacchettiS.A?survey?of?telomerase?activity?in?human?cancer.Eur?J?Cancer，1997，33：787-791)。細(xì)胞中hTERT的表達是端粒酶活性的主要決定因素，它在大部分腫瘤細(xì)胞中高表達(見參考文獻：Cong?YS，Wight?WE，Shay?JW.Human?telomeraseand?its?regulation.Microbiol?Mol?Biol?Rev，2002，66：407-425)。hTERT基因啟動子作為腫瘤特異性啟動子被運用到多種腫瘤的靶向基因治療方案中，但其活性較弱，下游基因表達產(chǎn)物往往難以實現(xiàn)理想的效果(見參考文獻：Gu?J?andFang?B：Telomerase?promoter-driven?cancer?gene?therapy.Cancer?Biol?Ther，2003，2：S64-S70)。如果能夠增強hTERT基因啟動子的活性，必將推動腫瘤靶向治療的進步，具有重要的理論和臨床意義。