[發明專利]青霉烯酸硫醇汞鹽及其制備方法

無效

• 申請號: 200910056685.0
• 申請日: 2009-08-20
• 公開（公告）號: CN101654460A
• 公開（公告）日: 2010-02-24
• 發明（設計）人: 曹成喜;周培;謝鵬;席濤;樊柳蔭;張薇
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07F3/14
• 分類號: C07F3/14
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

技術領域

本發明涉及一種化工技術領域的汞鹽及其制備方法，具體是一種青霉烯酸硫醇汞鹽及其制備方法。

背景技術

重金屬離子是有毒的，持久的環境污染物。在自然環境中，特別是水體和土壤中，殘留的重金屬離子可以直接或者間接的進入人體，與人體內的蛋白質或功能性酶發生不可逆轉的強烈作用，對人類的健康構成嚴重的威脅。因此，對環境中的重金屬的檢測和監控是非常必要。現在比較常用的重金屬檢測方法是儀器分析法，例如原子吸收光譜法(atomic?absorption?spectroscopy，AAS)，電感耦合等離子體發射光譜法(ICP-AES)，電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)，離子色譜法等。儀器分析方法比較準確，但是也存在耗時長，成本高，前處理復雜，處理通量小等缺點。

重金屬離子的免疫學檢測方法是一種基于具有親和性和特異性的“抗原-抗體”反應的分析方法。因分子量小且免疫原性弱，重金屬離子不能直接誘導動物產生抗體，因此需要將重金屬離子以一定方式與蛋白質連接形成重金屬離子全抗原，利用制備出的全抗原誘導動物產生針對重金屬離子特異的抗體。免疫學方法具有快速，準確，處理通量大，前處理簡單，成本低等特點，國內外已有用免疫學方法檢測重金屬離子的報道。重金屬離子的免疫學方法的核心在于制備出高度特異的單抗隆抗體，而能否制備出特異的抗體的關鍵又在于重金屬離子半抗原的制備。目前，國內外研究機構在制備重金屬離子半抗原時使用的螯合劑主要是乙二胺四乙酸(EDTA)，二乙烯三胺五乙酸(DPTA)，乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)，或類似的衍生物作為偶聯劑，以一定比例與金屬離子形成籠形結構的絡合物。

現有技術中免疫學方法制備抗體的缺點主要有：1、免疫系統針對應答的是包含金屬鍵在內的籠形結構，因此金屬在抗原-抗體反應中不再起關鍵作用，起決定作用的是復合物的形狀而不是與抗原結合點直接的物理接觸。Wylie，D.E.等在《Proc.Natl.Acad.Sci.USA》(美國科學院院刊)1992年第89期4104-4108頁發表了題為《Monoclonal?antibodies?specific?for?mercuric?ions》(針對汞離子特異的單克隆抗體)一文，文中提及針對金屬絡合物或者含配位金屬的蛋白特異的抗體將會與表位具有與誘導抗體產生的抗原相同構型的金屬絡合物結合，也就是說，這種抗體與其他金屬有交叉反應性，所以這種特異性針對特定金屬的特異性不強；2、絡合物不穩定，汞離子在動物體內會被功能性酶剝奪，降低了免疫原性，造成動物中毒甚至死亡。因此，國內外還沒有通過使用螯合劑制備出汞離子單克隆抗體的例子。有研究者使用谷胱甘肽作為偶聯劑(D.E.Wylie，L.D.Carson，R.Carlson，F.W.Wagner，S.M.Schuster，Anal.Biochem.194(1991)381)，連接汞離子和蛋白質，這種方法改進了螯合劑作為偶聯劑的缺點，汞離子與谷胱甘肽的硫醇基通過共價鍵連接，在動物體內不會解離，但是也有缺點：谷胱甘肽作為偶聯劑，免疫原性過低，產生的抗體效價很低。

因此，本發明要解決的技術問題是：克服現有技術中制備的汞離子抗原特異性不強，抗原安全性差以及免疫原性過低的缺點，提供一種新的抗原及其制備方法。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種青霉烯酸硫醇汞鹽及其制備方法。本發明的制備方法反應體系簡單，制備過程簡單；制備得到青霉烯酸硫醇汞鹽性質穩定，可作為汞離子的半抗原。

本發明是通過以下技術方案實現的，

本發明涉及一種青霉烯酸硫醇汞鹽，具體結構如下：

其中，R₁為C₆H₅-CH₂-，R₂為Na、K或H。

本發明還涉及所述青霉烯酸硫醇汞鹽的制備方法，包括如下步驟：

步驟一，在咪唑的存在下，將青霉素G鈉鹽或青霉素G鉀鹽與氯化汞反應；

步驟二，純化反應產物，制備得到青霉烯酸硫醇汞鹽。

步驟一中，所述反應的pH為6.0～9.0。

步驟一中，所述反應在60℃下進行。

步驟一中，所述反應的時間為2小時。

步驟二中，所述純化為：10000rpm離心純化反應產物。

步驟二中，所述純化為：10000rpm離心5min純化反應產物。