[發明專利]一種HURP基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應用

無效

• 申請號: 200910056098.1
• 申請日: 2009-08-07
• 公開（公告）號: CN101988108A
• 公開（公告）日: 2011-03-23
• 發明（設計）人: 張云福;裘建英
• 申請（專利權）人: 芮屈生物技術(上海)有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海申蒙商標專利代理有限公司 31214
• 代理人: 周豐

【技術領域】

本發明涉及一種試劑盒，具體地說關于一種HURP基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應用

【背景技術】

前列腺癌(prostatic?carcinoma，prostatic?cancer)是男性生殖系最常見的惡性腫瘤，發病隨年齡而增長，其發病率有明顯的地區差異，西歐和北美地區已高過肺癌，在男性是癌癥死亡的第1位。我國以前發病率較低，但由于人口老齡化，近年來發病率有所增加，從1993年的每10萬人的發病率1.7上升到2000年的10萬分之4.55，到2005年上升到7.9。雖然這一發病率與其他腫瘤相比還相對較低，但對于城市男性來說，前列腺癌的發病率已在所有腫瘤中居第十位，應引起高度關注。前列腺癌的發病與年齡呈正相關：據國外統計，50歲以下男性很少發生，50～60歲發病占前列腺癌的1/3，70歲以上約占1/2，80歲以上約占3/4。前列腺癌的病因目前尚不完全清楚，大量臨床研究提示，前列腺癌與性激素有關，特別是雄性激素與前列腺癌的發病存在非常明顯的因果關系。雄性激素高的人群前列腺癌的發病，要比雄性激素低的人群高；而通過辠丸切除或各種藥物減少雄性激素的合成，阻斷雄性激素的作用可以達到治療前列腺癌的目的。專家介紹說，前列腺癌與遺傳有關，直系親屬中如果有前列腺癌的，其本人患前列腺癌的風險要比其他人高一倍。目前大家比較公認的是，前列腺癌與種族有關，前列腺癌在黑人中更為常見。也有研究提示，環境污染、淋球菌感染、前列腺增生、過量飲用咖啡和酒類等也與前列腺癌發生有關。此外，前列腺癌與飲食有關，長期高脂肪、高蛋白飲食與前列腺癌高度相關。專家介紹說，在2007年美國泌尿外科年會上，與會學者在討論預防前列腺癌何種飲食最好時，大家得出的結論是中餐最好。傳統中餐的特點是新鮮蔬菜多，肉食相對較少，還配有米飯和面條等主食，是一個合理的飲食結構。有專家認為，之所以歐美前列腺癌成為男性泌尿系統發病率最高的腫瘤，其中一個重要的原因就是與西餐的飲食結構有關。

由于前列腺癌在早期沒有任何癥狀，患者往往容易錯過最佳的治療時機，導致診療難度加大。其實前列腺疾病是一種非常普通的男性疾病，發現得越早，治療效果就越好。在大型義診咨詢活動中，北京大學第三醫院為100位老年男性提供了免費的前列腺特異性抗原(PSA)檢查。PSA是前列腺腺體和導管細胞分泌的一種蛋白質，正常時血中含量很少。一旦患有前列腺癌，PSA值將升高。PSA是目前公認有效的前列腺癌早期診斷方法，它可以敏感地確定前列腺癌的發生。由美國和瑞典科研人員進行的研究顯示，男性在50歲之前進行PSA檢測，可以提前25年預測前列腺癌的發生。與通常的直腸指診、直腸超聲檢查比較，PSA具有測定結果客觀、定量、無晝夜變化、不受檢查者技術影響，以及測定方法更易為患者接受等優點。在多數情況下，PSA檢測可以在前列腺發病初期就發現腫瘤，使更多的前列腺癌患者獲得根治性手術的機會，提高腫瘤的治愈率。近來，PSA的診斷陽性率有所下降，許多病理切片已證實是前列腺癌但PSA的檢測是陰性。因此，尋找更有臨床意義的診斷指標非常迫切。

研究證明HURP(Hepatoma?up-regulated?protein)是肝癌上調蛋白。HURP基因的過度表達已被發現在前列腺癌中、膀胱移行細胞癌中，也發現在肝癌中、正常人不表達HURP基因。可作為前列腺癌侵襲轉移的預測指標。隨著分子生物技術日益完善，功能基因組學，癌癥基因組學等研究的深入展開，至今，我們已有可能在基因水平上做更精確的早期診斷，在癌變前期或癌細胞形成(單克隆時)就能做到基因水平的早期預測診斷。本發明采用核酸原位雜交技術，檢測HURP基因的表達變化，對臨床上早期基因水平預測前列腺癌等的發生有非常重要的臨床意義。

本發明采用的原位雜交技術(in?situ?hybridization)是將分子生物學與細胞化學技術結合起來，以標記的核酸分子為探針，在組織細胞原位檢測特異性核酸分子的技術。其原理是使含有特異序列、經過標記的核酸單鏈(即探針)，在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發生雜交，再以放射自顯影或免疫細胞化學方法對標記探針進行探測，從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。

【發明內容】

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種HURP基因的原位雜交檢測試劑盒的用途。

本發明的再一的目的是，提供一種HURP基因的原位雜交檢測試劑盒。

本發明的另一的目的是，提供一種HURP基因的原位雜交檢測方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：