[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)醫(yī)藥級(jí)透明質(zhì)酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910054155.2
• 申請(qǐng)日: 2009-06-30
• 公開（公告）號(hào): CN101935363A
• 公開（公告）日: 2011-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付愛玲;曾輝;張延良;黃宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海佰加壹醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/08
• 分類號(hào): C08B37/08;C12P19/04;A61K47/36;A61P19/02;A61P27/02;A61P41/00;C12R1/46
• 代理公司: 上海天翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于發(fā)酵純化技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種生產(chǎn)醫(yī)藥級(jí)透明質(zhì)酸的方法。

背景技術(shù)

透明質(zhì)酸(Hyaluronic?acid，HA)，又名透明酸或玻璃酸，是一種大分子粘多糖，廣泛存在于生物體的結(jié)締組織中。在不同組織中HA的生理作用有所不同，如在關(guān)節(jié)滑液中主要為潤滑作用；在血管壁中主要是調(diào)節(jié)通透性；在皮膚中主要表現(xiàn)為保水作用。另外，HA作為聚陰離子電解質(zhì)，分子上所帶的大量負(fù)電荷，可調(diào)節(jié)周圍正負(fù)離子的濃度，抑制多種酶的活性，廣泛應(yīng)用于眼科粘性手術(shù)、治療關(guān)節(jié)病、軟組織修復(fù)和作為藥物載體等，特別是預(yù)防和減少外科手術(shù)后組織粘連中取得了較大的進(jìn)展。

生產(chǎn)透明質(zhì)酸的方法有動(dòng)物提取法，即直接從動(dòng)物體中提取，受原料的限制，該方法所生產(chǎn)的透明質(zhì)酸產(chǎn)量并不能滿足人們的需要，而且由于該方法是從動(dòng)物體中直接提取透明質(zhì)酸，所得到的透明質(zhì)酸的質(zhì)量也不能控制，從而導(dǎo)致透明質(zhì)酸產(chǎn)量和質(zhì)量的不穩(wěn)定。為提高透明質(zhì)酸的產(chǎn)量和質(zhì)量，近年來，人們開始利用微生物發(fā)酵的方式生產(chǎn)透明質(zhì)酸，微生物發(fā)酵后的發(fā)酵液需要采用合適的提純方法對(duì)該發(fā)酵液進(jìn)行提純，現(xiàn)有提純方法一般有過濾法，該法采用生物膜過濾，由于發(fā)酵液中菌體等雜質(zhì)較多，極易造成膜孔堵塞，過濾時(shí)間長，濾液中所含蛋白等雜質(zhì)較多，所生產(chǎn)的透明質(zhì)酸產(chǎn)品質(zhì)量較低，不能應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是透明質(zhì)酸分離純化過程中，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行過濾的耗時(shí)長，濾液中所含蛋白等雜質(zhì)較多，從而使生產(chǎn)出的透明質(zhì)酸不能應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)的問題，并提供一種生產(chǎn)醫(yī)藥級(jí)透明質(zhì)酸的方法。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案解決該技術(shù)問題：

一種生產(chǎn)醫(yī)藥級(jí)透明質(zhì)酸的方法，至少包括純化方法部分，所述純化方法部分以透明質(zhì)酸發(fā)酵液為原料，所述純化方法部分包括：

a、用第一乙醇稀釋透明質(zhì)酸發(fā)酵液，所得稀釋液用硅藻土和珍珠巖預(yù)涂的板框進(jìn)行過濾，得到透明質(zhì)酸濾液；

b、將透明質(zhì)酸濾液加入第二乙醇進(jìn)行沉淀，沉淀用水溶解，所得溶解液加入十六烷基三甲基氯化銨溶液進(jìn)行絡(luò)合，所得沉淀用水清洗，得到絡(luò)合沉淀，將絡(luò)合沉淀加入到第一氯化鈉溶液進(jìn)行解離，得到解離液；

c、將解離液用第三乙醇沉淀，所得沉淀脫水干燥得到透明質(zhì)酸。

本發(fā)明采用硅藻土和珍珠巖預(yù)涂的板框進(jìn)行過濾，其中珍珠巖作為助濾劑，使得到的透明質(zhì)酸濾液濁度、蛋白等雜質(zhì)含量均有大幅度下降。

作為一種優(yōu)選，本發(fā)明所采用的硅藻土為細(xì)號(hào)硅藻土，珍珠巖為中號(hào)珍珠巖，中號(hào)珍珠巖介于粗號(hào)和細(xì)號(hào)珍珠巖之間，既保留了粗號(hào)珍珠巖的架橋作用又起到細(xì)號(hào)珍珠巖的吸附作用，保持較高空隙率，縮短過濾時(shí)間，同時(shí)，細(xì)號(hào)硅藻土的吸咐作用較好，能保障被過濾液體的透光好。

為使上述有益效果能夠順利實(shí)現(xiàn)，a步驟中所使用的板框是采用預(yù)涂比例為10∶1-100的中號(hào)珍珠巖與細(xì)號(hào)硅藻土進(jìn)行預(yù)涂的。

表1是某兩次生產(chǎn)透明質(zhì)酸的產(chǎn)品質(zhì)量的對(duì)比，這兩次生產(chǎn)透明質(zhì)酸的純化方法以相同的透明質(zhì)酸發(fā)酵液為原料，除了過濾透明質(zhì)酸發(fā)酵液是否使用珍珠巖有所不同，透明質(zhì)酸發(fā)酵液的純化所涉及的其它各種條件均在本發(fā)明所限定的范圍內(nèi)進(jìn)行且一致。

表1