[發明專利]一種具有抗氧化性活性的乳清蛋白活性肽及其制備方法

有效

• 申請號: 200910053596.0
• 申請日: 2009-06-23
• 公開（公告）號: CN101928742A
• 公開（公告）日: 2010-12-29
• 發明（設計）人: 劉志東;王蔭榆;郭本恒;劉振民;吳正鈞;周方方
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K2/00;A23L1/305;A61K8/64;A61K38/01;A61P39/06
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 薛琦;朱水平

技術領域

本發明屬于食品生物技術領域，特別涉及通過酶解從乳清蛋白中獲得具有抗氧化功能活性肽的方法，以及由該方法獲得的具有抗氧化功能的活性肽及其應用。

背景技術

牛乳是一種成分復雜的生物流體，其中蛋白質含量為30～35g/L，主要由酪蛋白和乳清蛋白組成，其中酪蛋白約占80％，乳清蛋白約占20％。牛乳中含有大量不同活性的生物活性肽，這些肽或自然存在于乳中或源于蛋白水解后的產物。乳清蛋白經蛋白酶酶解得到的生物活性肽因具有多種生理功能，如免疫調節、抗血栓、抗高血壓、降膽固醇、抗菌等，是一種多功能營養因子，被廣泛的應用于食品和醫藥等領域。

近年來，陸續發現某些氨基酸、蛋白質和蛋白質酶解物還具有清除自由基的抗氧化的活性。如Jung等人(1995)，Chen等人(1996，1998)研究發現某些氨基酸，如Glu、Met、Tyr、His、Lys、Pro、Cys等具有清除羥基自由基的作用。Satué-Gracia等人(2000)發現乳清蛋白中的乳鐵傳遞蛋白對鐵具有親合力，特別是在富含鐵的嬰兒食品中能夠抑制由鐵催化的氧化作用，其認為乳清蛋白的抗氧化活性可能是由于其提供了氫原子還原自由基以及來源于半胱氨酸的游離的巰基基團而抑制了脂類的自動氧化。Rival等人(2001)發現酪蛋白和酪蛋白酶解物具有抑制亞油酸氧化的作用和自由基清除活性。2003年和Xiong發現乳清蛋白的promatex酶解物在烤豬肉餅中具有抗氧化效果，其推測可能是通過抑制初期的脂類氧化反應(防止氫過氧化物和共扼二烯烴的形成)，進而延遲了氧化的進程。

自由基是人體生命活動過程中生物化學反應的中間產物。正常情況下，機體內自由基的產生和清除處于一種動態平衡中，不會對機體造成損害。但當自由基和活性氧基團(ROS)的產生過量時，或者隨著年齡的增長，機體正常的氧化還原平衡被破壞；脂類，蛋白質和DNA就會發生氧化反應，導致組織細胞結構和功能的破壞并引起機體的損傷衰老，也是誘發腫瘤等惡性疾病的重要因素。研究發現，通過補充抗氧化劑可以清除自由基，提高機體的抗氧化能力，降低機體氧化應激水平。因此，抗氧化的藥物或食品得到了廣泛的研究和應用。

但是現有的乳源生物活性肽是作為多功能營養因子被生產制備的。通常以蛋白質水解度為衡量標準，而不是以特定的功能特性(如抗氧化活性)為目標來進行制備的，生產工藝中并沒有特別的避免抗氧化活性的損失。因此這樣所獲得的乳源生物活性肽不僅成分復雜，具有特定功能特性的活性肽含量較低，抗氧化活性不強，功能特性不專一，而且還會造成原料的大量浪費，生產成本較高。

發明內容

因此，本發明要解決的技術問題就是針對現有的乳清蛋白活性肽存在的抗氧化活性肽含量低，抗氧化活性不強的不足，提供一種具有抗氧化活性的乳清蛋白活性肽及其制備方法，該制備方法特別富集了乳清蛋白活性肽中的抗氧化的成分，避免了抗氧化活性的下降，所得的乳清蛋白活性肽具有良好的抗氧化活性，可以作為抗氧化的功能性產品。

本發明人選用各種蛋白酶來水解乳清蛋白，在制備過程中采用可以保留抗氧化活性的方法，避免導致抗氧化活性降低的操作，終于得到了具有良好抗氧化活性的乳清蛋白活性肽。

因此，本發明解決上述技術問題的技術方案是，一種具有抗氧化活性的乳清蛋白活性肽的制備方法，包括以下步驟：

(1)將蛋白酶加入乳清蛋白溶液中進行酶解，其中酶解溫度為40～60℃，pH6.0～8.0；(2)酶解完成后，滅活蛋白酶；(3)將酶解液中未水解的乳清蛋白沉淀去除，取上清液；(4)上清液用截留分子量≤10,000道爾頓的超濾膜進行超濾，收集分子量≤10,000道爾頓的肽的濾液；(5)濾液濃縮；(6)濃縮液脫鹽；(7)濃縮脫鹽后的溶液，然后冷凍干燥。