[發明專利]利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法

無效

• 申請號: 200910052895.2
• 申請日: 2009-06-11
• 公開（公告）號: CN101576523A
• 公開（公告）日: 2009-11-11
• 發明（設計）人: 惠春;邢玉梅
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N27/02
• 分類號: G01N27/02;G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 毛翠瑩

1、一種利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于包括如下步驟：

1)采用由4個微電極陣列檢測單元構成的微電極陣列阻抗生物傳感器芯片，每個微電極陣列檢測單元包括支撐層、基底層、微傳感電極層、絕緣層和儲液池五層結構；所述微傳感電極層有1～100個通道的微傳感電極，每個微傳感電極的尺寸范圍為10μm～50μm，微傳感電極間距為10μm～30μm；

2)提取1-5毫升的痰液或血液樣品，加入到微電極陣列阻抗生物傳感器芯片儲液池中，經液化處理后，再提取1-5ul?A型特異性蛋白質抗原加入到微電極陣列阻抗生物傳感器芯片儲液池中，使儲液池中痰液或血液樣品中的腫瘤細胞被A型特異性蛋白質抗原所修復，形成A型特異性蛋白質抗原-腫瘤細胞生物組合體；

3)將一種B型特異性蛋白質抗體修復到Fe₃O₄磁性微球上，經3-10分鐘免疫反應，形成抗體-磁微球，再將這種抗體磁微球1-5ul加入到微電極陣列阻抗生物傳感器芯片儲液池中，使抗體-磁微球俘獲儲液池中的A型特異性蛋白質抗原-腫瘤細胞生物組合體，并在25-30℃進行免疫反應，反應時間2-6分鐘，反應后形成磁微球-腫瘤細胞生物磁性組合體；

4)在微電極陣列阻抗生物傳感器芯片支撐層下方通過施加磁鐵產生磁力，使磁微球-腫瘤細胞生物磁性組合體全部吸附到微電極陣列阻抗生物傳感器芯片表面上；借助微型三電極體系，以微傳感電極為工作電極，以微型鉑電極為對電極，以微型Ag/AgCl電極為參考電極，通過阻抗分析儀對微傳感電極的阻抗特性進行并行掃描式測試，探測確定是否存在腫瘤細胞。

2、根據權利要求1的利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于所述微電極陣列阻抗生物傳感器芯片采用聚對二甲苯或聚酰亞胺作為基底層和絕緣層材料，選用惰性貴金屬作為微傳感電極材料，選用SU-8光刻膠作為儲液池材料，選用單晶硅作為支撐層材料。

3、根據權利要求1的利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于所述微電極陣列阻抗生物傳感器芯片中的基底層厚度為5～20μm。

4、根據權利要求1的利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于所述微電極陣列阻抗生物傳感器芯片中的微傳感電極層厚度為0.4～1μm。

5、根據權利要求1的利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于所述微電極陣列阻抗生物傳感器芯片中的絕緣層厚度為2～4μm。

6、根據權利要求1的利用微電極陣列阻抗生物傳感器芯片檢測腫瘤細胞的方法，其特征在于所述微電極陣列阻抗生物傳感器芯片中的儲液池高度為50～500μm，儲液池底部尺寸為250μm×250μm～850×250μm，厚度為50～200μm。