[發明專利]早期預測慢性乙肝發展成肝硬化的hsa-mir-122試劑盒及檢測方法無效
| 申請號: | 200910051493.0 | 申請日: | 2009-05-19 |
| 公開(公告)號: | CN101555520A | 公開(公告)日: | 2009-10-14 |
| 發明(設計)人: | 孫樹漢;張毅;賈音;費明鈺 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍第二軍醫大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海德昭知識產權代理有限公司 | 代理人: | 丁振英 |
| 地址: | 20043*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 早期 預測 慢性 乙肝 發展 肝硬化 hsa mir 122 試劑盒 檢測 方法 | ||
1、一種早期預測慢性乙型肝炎發展成肝硬化的hsa-mir-122檢測試劑盒,其特征在于該試劑盒包括
hsa-mir-122反轉錄引物,序列如SEQ?ID?NO:1所示;
Real-time?PCR上游引物,序列如SEQ?ID?NO:2所示;
Real-time?PCR下游引物,序列如SEQ?ID?NO:3所示。
2、根據權利要求1所述的一種早期預測慢性乙型肝炎發展成肝硬化的hsa-mir-122檢測試劑盒,其特征在于該試劑盒主要由以下試劑組成:
A)hsa-mir-122反轉錄引物,序列如SEQ?ID?NO:1所示,1管,濃度:10μM,100μl/管;
B)Real-time?PCR上游引物,序列如SEQ?ID?NO:2所示,1管,濃度:10μM,100μl/管;
Real-time?PCR下游引物,序列如SEQ?ID?NO:3所示,1管,濃度:10μM,100μl/管;
C)Trizol?reagent,1管,2000μl/管;
D)氯仿,1管,500μl/管;
E)無水乙醇,1管,7ml/管;
F)DEPC?H2O,1管,1000μl/管;
G)dd?H2O,1管,2000μl/管。
3、一種如權利要求1所述的早期預測慢性乙型肝炎發展成肝硬化的hsa-mir-122檢測試劑盒的檢測方法,其特征在于該檢測方法包括以下步聚:
按常規抽血取血清或血漿,用總RNA提取試劑處理血清或血漿,加氯仿離心后取上層水相,并富集血清或血漿中的小RNA;由反轉錄系統反轉錄hsa-mir-122成cDNA;用擴增系統進行Real-time?PCR擴增,測定hsa-mir-122含量。
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