[發(fā)明專利]保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取方法和裝置

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910050605.0
• 申請(qǐng)日: 2009-05-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101545836A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張成文;宋柱芹;吳建乾;林雪平;尹滿香;杜開(kāi)齊;張高忠;吳達(dá)龍;顧旭東;李斌;周新妹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 嘉興學(xué)院;張成文
• 主分類號(hào): G01N1/28
• 分類號(hào): G01N1/28;G01N33/48
• 代理公司: 上海開(kāi)祺知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 包文超;費(fèi)開(kāi)逵

1.一種保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取方法，包括如下步驟：

將磷酸酶抑制劑和裂解液等體積混合后冷凍至0-4℃，按相同體積分裝于微型離心管中，然后置于盛有冷凍液的容器中，將容器密閉后，在其一開(kāi)口處抽氣并使其內(nèi)的真空度為-5Pa--10Pa，之后將冷凍液溫度降至0-4℃，再取相同體積和相同類型的活體組織置于各個(gè)微型離心管內(nèi)，研磨并離心后取上清液為組織裂解液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取方法，其特征在于所述磷酸酶抑制劑為2mmol/L釩酸鈉溶液，所述裂解液為1-2％，w/v十二烷基磺酸鈉溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取方法，其特征在于所述組織裂解液，其中的蛋白濃度為1-4μg/μl。

4.一種保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取裝置，其特征在于，包括：

密閉容器，由頂蓋和容器腔體組成，腔體內(nèi)盛有冷凍液體，液體的體積小于腔體的容積；

12至24個(gè)大小相同的微型離心管，置于密閉容器的腔體內(nèi)，各個(gè)微型離心管中盛有相同體積的裂解液及磷酸酶抑制劑。

5.一種保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取裝置，其特征在于，包括：

密閉容器，由頂蓋和雙層容器腔體組成，容器腔體內(nèi)盛有冷凍液體，液體的體積小于腔體的容積；

管槽，與容器腔體側(cè)面內(nèi)壁固定連接，將腔體分為上下兩層，12至24個(gè)大小相同的微型離心管設(shè)置于管槽內(nèi)；

各個(gè)微型離心管中盛有相同體積的裂解液及磷酸酶抑制劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取裝置，其特征在于所述磷酸酶抑制劑為釩酸鈉溶液，所述裂解液為十二烷基磺酸鈉溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取裝置，其特征在于容器腔體側(cè)面和頂蓋面至少設(shè)有一個(gè)與容器內(nèi)腔相連通的抽氣口。

8.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的保持蛋白磷酸化狀態(tài)的組織細(xì)胞裂解液提取裝置，其特征在于所述密閉容器，腔體內(nèi)的真空度為-1～-10Pa。