[發明專利]銀蓮花的組織培養方法

無效

• 申請號: 200910049975.2
• 申請日: 2009-04-24
• 公開（公告）號: CN101869067A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園林植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上?？剖⒅R產權代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

1.銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)無菌材料的獲得

取萌發的幼嫩的芽，去除外面包裹的葉片后，用自來水沖洗1-3h后于超凈工作臺上，依次利用質量濃度為70-75％的乙醇浸泡10-50s，體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用無菌水沖洗4-6次，利用無菌濾紙吸干表面的水分后，再切成0.5-2cm長的帶腋芽的節段，節段接種于芽誘導培養基上；

(2)芽的分化和增殖

節段接種于芽誘導培養基上2-4周后，腋芽部位開始膨大，出現黃綠色突起，3-5周后可見芽分生組織，再培養1-2個月，不定芽可以長到2-3cm，將不定芽切下轉入芽的增殖培養基中進行增殖培養，不定芽基部的愈傷組織較多，但不影響增殖，不定芽生長迅速且無玻璃化等不良現象，在培養基中生長發育良好；

(3)不定芽壯苗培養

在芽的增殖培養基上，誘導出的叢生芽中每叢有2-3株能夠伸長，其余的處于矮化狀態，將叢生芽分成小叢后，轉至壯苗培養基上生長，不定芽迅速伸長；

(4)生根培養

取3-4cm的不定芽小植株，轉接入生根培養基中誘導生根，5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基，25-40天后可以長至4-6cm，根系粗壯，須根眾多，生根率為90-100％；

(5)煉苗與移栽

生根培養15-30天，根系長至0.5-1cm時，選擇根系發達、生長健壯的無菌苗，于室內開瓶煉苗2-4天，然后將苗取出，洗凈根部的瓊脂，栽于溫室內的苗床中馴化20-40天，即可移栽室外，給予肥水管理，最終的移栽成活率為90-95％。

2.根據權利要求1所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的芽誘導培養基包括MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L。

3.根據權利要求2所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的芽誘導培養基優選MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

4.根據權利要求1所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的芽的增殖培養基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

5.根據權利要求4所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的芽的增殖培養基優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

6.根據權利要求1所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的壯苗培養基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

7.根據權利要求6所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的壯苗培養基優選MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

8.根據權利要求1所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的生根培養基包括MS+NAA0.05-0.2mg/L。

9.根據權利要求8所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的生根培養基優選MS+NAA0.05mg/L。

10.根據權利要求2或4或6或8所述的銀蓮花的組織培養方法，其特征在于，所述的培養基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L，培養基pH5.5-6.0，培養溫度24-26℃，光照1500-2500lx。