[發明專利]矮蒲葦的組織培養方法

無效

• 申請號: 200910049859.0
• 申請日: 2009-04-23
• 公開（公告）號: CN101869058A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園林植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術領域

本發明涉及一種植物的組織培養方法，尤其是涉及矮蒲葦的組織培養方法。

背景技術

矮蒲葦為禾本科蒲葦屬植物，分布廣泛，為常綠多年生草本植物，株高80-100cm，圓錐花序大，羽毛狀，呈銀白色，是國外著名的觀賞草。可以用于園林綠化或岸邊。矮蒲葦花穗長而美麗，庭院栽培壯觀而雅致，或植于岸邊，入秋賞其銀白色羽狀穗的圓錐花序，也可用作干花，或花境觀賞草專類園內使用，具有優良的生態適應性和觀賞價值，是良好的花鏡與地被材料。但是，作為國外引進的新品種，矮蒲葦引種數量較少，種苗供應受到一定的限制。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種可提高繁殖速度和苗的整齊度，并提高性狀穩定性的矮蒲葦的組織培養方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

矮蒲葦的組織培養方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)無菌材料的獲得

春季取萌發的幼嫩的枝條，去除枝葉，用自來水沖洗1-3h后于超凈工作臺上，依次利用質量濃度為70-75％的乙醇浸泡10-50s，體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用無菌水沖洗4-6次，利用無菌濾紙吸干表面的水分后，再切成0.5-2cm長的帶腋芽的節段，節段接種于腋芽誘導培養基上；

(2)芽的分化和增殖

節段接種于腋芽誘導培養基上1-3周后，腋芽部位開始膨大，出現綠色突起，3-5周后可見芽分生組織，再培養1-2個月，小的不定芽可以長到3-4cm，將不定芽切下轉入不定芽增殖培養基中進行增殖培養，不定芽基部的愈傷組織較多，但不影響增殖，不定芽生長迅速且無玻璃化等不良現象，在培養基中生長發育良好；

(3)不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基上，誘導出的叢生芽中每叢有2-3株能夠伸長，其余的處于矮化狀態，將叢生芽分成小叢后，轉至壯苗培養基上生長，不定芽迅速伸長，15-30天后可以長到3-4cm；

(4)生根培養

取3-4cm的不定芽小植株，轉接入生根培養基中誘導生根，5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基，25-40天后可以長至4-6cm，根系粗壯，須根眾多，生根率為90-100％；

(5)煉苗與移栽

生根培養15-30天，根系長至0.5-1cm時，選擇根系發達、生長健壯的無菌苗，于室內開瓶煉苗2-4天，然后將苗取出，洗凈根部的瓊脂，栽于溫室內的苗床中馴化20-40天，即可移栽室外，給予肥水管理，最終的移栽成活率為90-100％。

所述的腋芽誘導培養基包括MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L。

所述的腋芽誘導培養基優選MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。

所述的不定芽增殖培養基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L。

所述的不定芽增殖培養基優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的壯苗培養基包括MS+6-BA0.2-1.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

所述的壯苗培養基優選MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培養基包括MS+NAA0.1-0.3mg/L。

所述的生根培養基優選MS+NAA0.1mg/L。

所述的培養基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L，培養基pH5.5-6.0，培養溫度24-26℃，光照1500-2500lx。

與現有技術相比，本發明通過組培技術，極大提高了矮蒲葦的繁殖速度和苗的整齊度，并提高了其性狀的穩定性，可實現育苗的工廠化大批量生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

實施例1

(1)無菌材料的獲得

春季取萌發的幼嫩的枝條，去除枝葉，用自來水沖洗1h后于超凈工作臺上，依次利用質量濃度為70％的乙醇浸泡10s，體積濃度為0.5‰的汞浸泡10min，再用無菌水沖洗4次，利用無菌濾紙吸干表面的水分后，再切成0.5cm長的帶腋芽的節段，節段接種于包括MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L的腋芽誘導培養基上；

(2)芽的分化和增殖