[發(fā)明專利]地錦球的組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910049857.1
• 申請日: 2009-04-23
• 公開（公告）號: CN101869056A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權(quán)）人: 上海上房園林植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

1.地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)無菌材料的獲得

取大球莖上的小球莖，去除外面包裹的葉片后，用自來水沖洗1-3h后于超凈工作臺上，依次利用質(zhì)量濃度為70-75％的乙醇浸泡10-50s，體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用無菌水沖洗4-6次，利用無菌濾紙吸干表面的水分后，將小球莖接種于小球莖誘導培養(yǎng)基上；

(2)芽的分化和增殖

小球莖接種于小球莖誘導培養(yǎng)基上2-4周后，小球莖部位開始膨大，出現(xiàn)綠色突起，4-6周后可見芽分生組織，再培養(yǎng)1-2個月，小球莖可以長到1-2cm，將小球莖切下轉(zhuǎn)入小球莖增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，小球莖基部的愈傷組織較多，小芽也較多，但不影響增殖，不定芽生長迅速且無玻璃化等不良現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中生長發(fā)育良好；

(3)不定芽壯苗培養(yǎng)

在小球莖增殖培養(yǎng)基上，誘導出的叢生芽中每叢有2-3株能夠伸長，其余的處于矮化狀態(tài)，將叢生芽分成小叢后，轉(zhuǎn)至壯苗培養(yǎng)基上生長，不定芽迅速伸長，20-40天后小球莖可以長到0.2-0.5cm；

(4)生根培養(yǎng)

取0.2-0.5cm的小球莖，轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中誘導生根，15-30天后幼苗基部分化出白色的根原基，25-40天后可以長至2-3cm，根系粗壯，須根眾多，生根率為90-100％；

(5)煉苗與移栽

生根培養(yǎng)20-40天，根系長至0.5-1.5cm時，選擇根系發(fā)達、生長健壯的無菌苗，于室內(nèi)開瓶煉苗2-4天，然后將苗取出，洗凈根部的瓊脂，栽于溫室內(nèi)的苗床中馴化20-40天，即可移栽室外，給予肥水管理，最終的移栽成活率為90-100％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的小球莖誘導培養(yǎng)基包括MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的小球莖誘導培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的小球莖增殖培養(yǎng)基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的小球莖增殖培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的壯苗培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的生根培養(yǎng)基包括MS+NAA0.1-0.3mg/L。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的生根培養(yǎng)基優(yōu)選MS+NAA0.1mg/L。

10.根據(jù)權(quán)利要求2或4或6或8所述的地錦球的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L，培養(yǎng)基pH5.5-6.0，培養(yǎng)溫度24-26℃，光照1500-2500lx。