[發(fā)明專利]癌細(xì)胞靶向診斷聚酰胺胺/碳納米管復(fù)合材料的制備方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910049270.0
• 申請(qǐng)日: 2009-04-14
• 公開（公告）號(hào): CN101531800A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史向陽(yáng);沈明武;肖仕麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東華大學(xué)
• 主分類號(hào): C08L53/02
• 分類號(hào): C08L53/02;C08L23/22;C08K13/02;C08K9/04;C08K3/26;C08K5/09;C08K5/01;C08K5/07;C08K5/103;C08K5/524;A61K49/12
• 代理公司: 上海泰能知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 黃志達(dá);謝文凱

1.一種癌細(xì)胞靶向診斷聚酰胺胺/碳納米管復(fù)合材料的制備方法，包括：

(1)將多壁碳納米管進(jìn)行酸化處理2h，過濾，水洗，于60℃真空干燥，備用；

(2)聚酰胺胺樹狀大分子的異硫氰酸熒光素FI和葉酸FA的修飾

a.在含有60mg聚酰胺胺PAMAM的24mL無水二甲基亞砜DMSO溶劑中逐滴滴加含有4.4mg?FI的24mL?DMSO溶液，室溫下強(qiáng)磁力攪拌24小時(shí)，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物用纖維素透析膜逐次在PBS緩沖溶液4L×3和超純水4L×3，透析3天，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得G5.NH₂-FI；

或b.①在含有60mg?PAMAM的24mL無水DMSO溶劑中逐滴滴加含有4.4mg?FI的24mL?DMSO溶液，室溫下強(qiáng)磁力攪拌24小時(shí)，隨后將反應(yīng)產(chǎn)物用纖維素透析膜逐次在PBS緩沖溶液4L×3和超純水4L×3，透析3天，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得G5.NH₂-FI；

②將3.7mg?FA和9.3mg?1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽EDC溶解在3mLDMSO溶液中，室溫條件下磁力攪拌3小時(shí)，將反應(yīng)后的溶液逐漸滴加到12mL含30mgG5.NH₂-FI的DMSO溶液中，室溫條件下強(qiáng)磁力攪拌3天，將反應(yīng)后的產(chǎn)物用纖維素透析膜逐次在PBS緩沖液4L×3和超純水4L×3，透析3天，最后將純化后的產(chǎn)物冷凍干燥得G5.NH₂-FI-FA；

(3)取16.68mg酸化處理后的多壁碳納米管分散于12mL超純水中，隨后將含有12.82mg?EDC的DMSO溶液2mL滴加到多壁碳納米管的水溶液中，強(qiáng)磁力攪拌，反應(yīng)3小時(shí)；

(4)將含有4.6mg步驟(2)制備的修飾PAMAM樹狀大分子的1mL水溶液滴加到步驟(3)的所得溶液中，強(qiáng)磁力攪拌下反應(yīng)48小時(shí)，即得CNT/G5.NH₂-FI-FA或CNT/G5.NH₂-FI，并分散在超純水溶液中、離心，重復(fù)3～6次；

(5)將步驟(4)中制備的CNT/G5.NH₂-FI-FA或CNT/G5.NH₂-FI復(fù)合物分散在10mL超純水中，與9.8μL三乙胺溶液充分混合后，逐滴加入含7.2mg醋酸酐的甲醇溶液1mL，強(qiáng)磁力攪拌下反應(yīng)24小時(shí)，制得表面電荷為中性的CNT/G5.NHAc-FI-FA或CNT/G5.NH₂-FI復(fù)合物；

(6)將步驟(5)制備的復(fù)合物用纖維素透析膜逐次在PBS緩沖液4L×3和超純水4L×3，透析3天，最后冷凍干燥保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種癌細(xì)胞靶向診斷聚酰胺胺/碳納米管復(fù)合材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中酸化處理所用的酸為濃硝酸或濃硝酸與濃硫酸的混合酸，混合酸中HNO3/H2SO4＝3∶1(v/v)，多壁碳納米管與酸的重量比為1∶5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種癌細(xì)胞靶向診斷聚酰胺胺/碳納米管復(fù)合材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)和(6)中的纖維素透析膜為MWCO10000～50000纖維素透析袋。