[發明專利]C端缺失型p43蛋白及其在腫瘤治療藥物中的應用

有效

• 申請號: 200910047144.1
• 申請日: 2009-03-06
• 公開（公告）號: CN101824083A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 劉大濤;刑玉華;胡立德;劉剛;譚小釘;鄒亮;黃相紅;王慧敏;姚鈺舜;王嬿;吳光昊;王淵琦
• 申請（專利權）人: 信誼藥廠
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C07K19/00;C07K17/08;A61K38/17;A61K47/48;A61P35/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳哲鋒

技術領域

本發明涉及缺失型重組人p43蛋白及其在腫瘤治療藥物中的應用。?

背景技術

惡性腫瘤是威脅人類健康的大敵，醫學界對惡性腫瘤的治療主要采取殺死癌細胞為主的方法，即：手術、化療、放療等。這些方法在殺死癌細胞的同時也損傷正常細胞，并且容易使腫瘤細胞產生耐藥性。因而，人們一直在探索一種能專一性地殺死腫瘤細胞且不損傷正常細胞，同時又不易使腫瘤產生耐藥性的治癌方法。目前用于治療腫瘤的新藥層出不窮。近年來，隨著分子生物學技術的快速發展，人們逐漸關注運用基因工程藥物治療惡性腫瘤的方法。傳統的腫瘤化療大多使用細胞毒性藥物，在殺死腫瘤細胞的同時也對正常細胞造成損害，削弱人的體質。所以很多癌癥晚期患者最后多因為無法承受治療而致死亡。惡性腫瘤有一個共同的特性，那就是局部的細胞瘋狂地、不受遏制地增殖，而維持這種增殖就意味著需要大量營養供應。在腫瘤形成的同時，瘤體的內部及周圍會形成大量供應養分的血管。那么如果能切斷這些供養“管道”，阻斷腫瘤的營養來源，腫瘤也就會衰竭而死。?

當前興起的新生血管抑制療法為徹底治療腫瘤帶來了曙光。研究發現腫瘤特別是實體瘤的生長需要大量的營養供應，在腫瘤周圍會形成大量的新生血管?？寡苌莎煼ㄖ饕峭ㄟ^抑制快速異常增殖的血管內皮細胞的生長，特異性抑制腫瘤血管內皮細胞增殖，從而達到阻止腫瘤血管生成，使腫瘤毛細血管發生萎縮，切斷腫瘤的營養供應，使腫瘤細胞凋亡或退化到最初的休眠狀態，從而達到治療癌癥的目的。?

經過近十年的不斷努力，現在已發現了多種有希望成為腫瘤治療藥物的新生血管抑制劑。其中最具代表性的是人血管內皮抑制素(human?endostatin)。有關人血管內皮抑制素(Endostatin)國際上首先報道是1997年1月Cell雜志?上刊登的美國哈佛醫學院福爾克曼(Folkman)研究小組的鼠內皮抑素基因的論文，該研究發現Angiostatin和Endostatin可以消除小鼠體內惡性腫瘤，而且未再復發。這兩種藥物是以阻止為腫瘤提供營養的血管的生長從而治療腫瘤的。當時引起了國際轟動，Endostatin迅速成為腫瘤治療領域的研究熱點。美國FDA在沒有完成臨床前研究的情況下特批30例對其它藥物已無反應的晚期癌癥病人于99年初用人血管內皮抑制素(Angiostatin)和鼠內皮抑素(Endostatin)混合基因工程針劑進行臨床試驗。。目前，Endostatin已經通過了FDA的一期臨床，目前正處于二期臨床階段。但由于Endostatin的溶解性較差，使得它的制備成本升高，同時在使用上也只能采用水針劑型，這使它的應用受到了很大的限制。?

p43蛋白是哺乳類動物氨酰tRNA合成酶的輔助因子，一方面直接調節內皮細胞形成毛細血管的生理過程，另一方面通過改變微環境來抑制腫瘤血管的生成。p43蛋白的抗血管生成活性及抑制腫瘤生長作用已經在體外及動物實驗獲得證實。人基因重組p43蛋白顯示出其被開發成新型治療癌癥藥物的潛力，對抗多種原發性和轉移性實體腫瘤均有效，并可與化療和放療協同治療。?

p43蛋白作為人體氨酰tRNA合成酶系的家族成員并且是內皮單核細胞激活肽的前體于1997年被Sophie?Q等人發現。p43蛋白為單鏈蛋白，全長312個氨基酸，二級結構含有11個β片層。韓國Imagene公司(WO01/95927)對人p43蛋白的結構、生物活性進行了深入的研究，結果顯示人p43蛋白可以抑制快速異常增殖的血管內皮細胞的生長，以及抑制雞胚尿囊膜新生血管生成，這說明p43蛋白具有潛在的抗腫瘤作用。?

但是，目前仍需要對p43蛋白進一步改進，得到抗腫瘤效果更好的藥物。?

發明內容

本發明的發明人經過大量研究發現，將p43蛋白的312個氨基酸的一部分切除得到的缺失型p43蛋白具有更高的抗腫瘤活性。?

因此，本發明的一個目的是提供缺失型p43蛋白，其具有更高的抗腫瘤活性。?

本發明的另一個目的是提供缺失型p43蛋白在治療抗腫瘤藥物中的用途。?

本發明的還有一個目的是提供一種用于抗腫瘤的藥物組合物，它包含缺失型p43蛋白。?

本發明提供了一種缺失型p43蛋白，它包括SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列中缺失第250-312位氨基酸所得到的蛋白。?

在本發明的一個優選實例中，所述缺失型p43蛋白包括SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列中缺失第265-312位氨基酸所得到的蛋白。?

在本發明的一個優選實例中，所述缺失型p43蛋白包括SEQ?ID?NO：1所示氨基酸序列中缺失第265-289位氨基酸所得到的蛋白。?