[發明專利]一種鮐魚耳石橫截面切片的制作及其年齡鑒定方法

無效

• 申請號: 200910046983.1
• 申請日: 2009-03-04
• 公開（公告）號: CN101539495A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 陳新軍;李綱
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/06;G01N21/17
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司
• 代理人: 宋 羽

技術領域

本發明涉及一種鮐魚耳石橫截面切片的制作及其年齡鑒定方法，具體涉及一種通過灼燒法來制作的鮐魚耳石橫截面切片及其年齡鑒定的方法，屬水產學領域。

背景技術

鮐魚是我國近海重要的經濟魚類之一，對鮐魚生長參數的合理估算是進行鮐魚資源科學評估的基礎，并且還是對鮐魚年齡的準確鑒定的一項極為重要的基礎性工作。

魚類自孵化初始，耳石就已經形成，之后半透明的冬輪和不透明夏輪每年都在耳石上沉積，共同組成了年輪。根據耳石上的輪紋數就可以確定魚類的年齡。因此，如何準確地對鮐魚耳石上的輪紋加以判讀，確定其年輪數是鮐魚年齡鑒定的關鍵技術問題。

鱗片、脊椎骨、耳石都曾被用來鑒定鮐魚的年齡。鮐魚鱗片小而薄，不易采集和保存，且冬輪和假輪極難區分，對年齡鑒定帶來極大困難。雖然鮐魚第I-V脊椎骨上的年輪比較明顯，但其立體的錐形形狀使得年輪在顯微鏡下也難以觀察，而且脊椎骨的采集必須切割魚體，因此是比較麻煩。

對耳石表面進行觀察是定鮐魚年齡最常用的方法，但鮐魚耳石為乳白色、且半透明，冬輪和夏輪不易區分，且耳石表面分布有眾多的輪紋，使得日輪、年輪和夏輪難以區分，對年齡鑒定造成極大困難，容易導致錯誤地判讀鮐魚的年齡。當耳石表面存在結晶體時，結晶體覆蓋輪紋，無法對其進行年齡鑒定。因此，本方法通過對耳石進行灼燒，加強了冬輪和夏輪的顏色對比，并通過判讀耳石橫截面上的輪紋，克服了日輪和結晶體對年輪的干擾，提高了年輪到可辨識度，從而達到提高鮐魚年齡鑒定準確度的目的。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種鮐魚耳石橫截面切片的制作及其年齡鑒定方法，該方法可有效提高鮐魚年齡的可辨識度和準確度。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案來實現：

一種鮐魚耳石橫截面切片的制作方法，包括以下步驟：

1)浸泡：將鮐魚耳石取出后，放入容器中，加入重量百分比濃度為70％的酒精，浸泡1周；

2)清洗耳石：將鮐魚耳石從容器中取出，放入盛有水的培養皿中，在解剖鏡下，用小毛刷將鮐魚耳石表面殘留的有機組織和雜質清洗干凈；

3)畫線：鮐魚耳石清洗干凈后，在解剖鏡下觀察，凹面朝上，找出鮐魚耳石的核心，然后用鉛筆畫一條穿過鮐魚耳石核心的標記線，在鮐魚耳石前區部位畫一條切割線；

4)切除耳石：在解剖鏡下，一手用鑷子將鮐魚耳石固定，另一手用解剖刀沿切割線，將鮐魚耳石前區部分切除；

5)灼燒：將切割后的鮐魚耳石從培養皿中取出，放置在吸水紙上將水吸干，然后將鮐魚耳石放置在帶有凹面的載波片上，用酒精燈灼燒至褐色或深棕色；

6)樹脂包埋：按1∶1.5的體積比將壓克力粉和固化劑配置成溶液，將溶液倒入塑料模具，溶液覆蓋模具底部即可，耳石切割面朝上并平行于模具底部，繼續加入溶液，加滿為止，在避光放置24小時，固化；

7)切割：將包埋有鮐魚耳石的模具以標記線為中心，切割成0.8-1.2mm的薄片；

8)打磨：將鮐魚耳石切片放置在磨床打磨盤上，分別用規格為P1200和P2000的防水砂紙打磨至0.3-0.7mm厚；

9)拋光：將規格為0.3μm的拋光粉配置成70～90g/L的懸浮液備用，將防水砂紙換成拋光絨布，用注射器吸入拋光粉懸浮液，均勻滴撒在絨布上，然后將切片兩面拋光。

所述的鮐魚年齡鑒定方法為，將載玻片一面用深藍色涂料完全覆蓋，晾干備用；將鮐魚耳石切片放置于涂有深藍色涂料的載玻片上，在CCD解剖鏡下，并滴上幾滴甘油，在反射光照射下，對輪紋進行判讀。

本發明中所用到的壓克力粉和固化劑，化學名稱為甲基丙烯酸甲酯，是金相式樣專用的進口樹脂材料，適用于PCB、FPC、半導體技術、微電子技術、醫學技術、光電技術等領域。在室溫下將壓克力粉和固化劑按適當比例混合，即可靜態固化，生成高分子聚合物--透明樹脂。其固化迅速，固化效果理想(固化時間：6min)；不會對人體造成傷害，無毒；使用安全、簡便。

制作本發明的鮐魚橫截面切片及其年齡鑒定時，需要特別注意以下幾點：

(1)鮐魚耳石薄且脆，不能通過直接切割獲取橫截面。因此用樹脂包埋，再通過切割、打磨來獲得鮐魚耳石的橫截面。橫截面應通過耳石核心，以保證橫截面包含完整的年輪信息。

(2)灼燒時間和程度控制。鮐魚耳石不能直接用火焰灼燒，應放置在載玻片上，用酒精燈外焰灼燒3-5秒，當鮐魚耳石由白色變為褐色或棕紅色時，立即停止灼燒。鮐魚耳石顏色為淡黃色時，說明灼燒時間不夠，可繼續灼燒至褐色或棕紅色。若鮐魚耳石灼燒過度，顏色由褐色轉變為黃灰色，鮐魚耳石則完全不透明。