[發(fā)明專利]普瑞巴林及其手性異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910045925.7
• 申請(qǐng)日: 2009-01-22
• 公開（公告）號(hào): CN101788542A
• 公開（公告）日: 2010-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉浩;潘穎;凌文婷;徐明明;王偉毅;嚴(yán)翠霞;吳曉毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海臣邦醫(yī)藥科技有限公司;上海市食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): G01N30/78
• 分類號(hào): G01N30/78
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及化合物柱前的衍生化反應(yīng)及測(cè)定方法，具體涉及N^α-(5- 氟-2，4-二硝基苯基)-D-纈胺酰胺與普瑞巴林及其手性異構(gòu)體在高沸點(diǎn)的非質(zhì)子性有機(jī)溶劑 中于微波輔助條件下進(jìn)行快速衍生化反應(yīng)后，用非手性高效液相色譜法或非手性高效液相色 譜與質(zhì)譜聯(lián)用分離測(cè)定普瑞巴林手性異構(gòu)體的方法。

背景技術(shù)

眾所周知，柱前衍生化方法作為測(cè)定手性化合物含量的常用方法，也是一種高檢測(cè)靈敏 度的檢測(cè)方法。對(duì)有手性中心且無(wú)紫外吸收或紫外吸收較弱的化合物，可采用合適的衍生化 方法進(jìn)行含量和手性異構(gòu)體的準(zhǔn)確測(cè)定。

普瑞巴林是一種弱紫外吸收的手性化合物，其化學(xué)名稱為(S)-3-(氨甲基)-5-甲基己 酸，用于治療癲癇和神經(jīng)疼痛。普瑞巴林手性異構(gòu)體幾乎沒有藥理活性，其化學(xué)名稱為(R) -3-(氨甲基)-5-甲基己酸，是普瑞巴林的重要雜質(zhì)，也是控制普瑞巴林質(zhì)量的重要指標(biāo)。

通常，普瑞巴林原料藥或用其制成的藥物制劑中含有微量的普瑞巴林手性異構(gòu)體，由于 普瑞巴林及其手性異構(gòu)體的紫外吸收很弱，使用常規(guī)的紫外檢測(cè)普瑞巴林存在一定困難，檢 測(cè)微量普瑞巴林手性異構(gòu)體就更加困難。現(xiàn)有技術(shù)中，使用手性高效液相色譜柱直接分離測(cè) 定普瑞巴林手性異構(gòu)體不但分離較差，且靈敏度低，試驗(yàn)成本高(參見：Journal?of Chromatograph?B?875(2008)148-153)。中國(guó)發(fā)明專利(專利號(hào)：200510057381.8，公開日：2006 年6月14日)公開了一種普瑞巴林手性異構(gòu)體的衍生化分離測(cè)定方法。該方法采用最為常用 的N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-L-氨基酸類化合物，例如N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-L- 丙胺酰胺，作為衍生化試劑，與普瑞巴林在柱前通過水浴加熱進(jìn)行衍生化反應(yīng)后，經(jīng)減壓干 燥除去低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑后重組，再用非手性高效液相色譜法分離測(cè)定普瑞巴林手性異構(gòu)體。 該方法的主要缺點(diǎn)在于：使用N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-L-氨基酸類化合物與普瑞巴林衍 生化反應(yīng)后，普瑞巴林手性異構(gòu)體衍生物在普瑞巴林衍生物之后洗脫，因此其色譜峰展寬較 大，兩衍生物之間的分離度較小時(shí)，普瑞巴林手性異構(gòu)體檢測(cè)的靈敏度較低，準(zhǔn)確性較差； 使用該方法進(jìn)行柱前衍生化反應(yīng)需在水浴中進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間加熱，且反應(yīng)結(jié)束后需在五氧化二磷 和氫氧化鉀的體系中進(jìn)行減壓干燥以去除低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑，再用其他有機(jī)溶劑溶解并過濾 以制備供試品溶液，后處理步驟非常繁瑣，且五氧化二磷、低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑廢氣的處理將增 加分離檢測(cè)成本并對(duì)環(huán)境造成影響；高效液相色譜所采用的流動(dòng)相含有不揮發(fā)的無(wú)機(jī)磷酸鹽， 不適用于高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析系統(tǒng)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明中所提及的名詞解釋如下：

普瑞巴林指的是化學(xué)名稱為(S)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸。

普瑞巴林手性異構(gòu)體指的是(R)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸。

普瑞巴林消旋體指的是含(S)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸和(R)-3-(氨甲基)-5-甲基 己酸，且含(R)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸大于10％以上。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種靈敏、簡(jiǎn)便、快速并更經(jīng)濟(jì)的普瑞巴林及其手性 異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法，所述方法具有檢測(cè)靈敏度更高，成本更低，分析過程簡(jiǎn)單、快速， 且所使用的流動(dòng)相更適合高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用等特點(diǎn)。

本發(fā)明提供了一種普瑞巴林及其手性異構(gòu)體的分離檢測(cè)方法，包括：

A)在進(jìn)色譜柱前，將普瑞巴林與衍生化試劑溶解在高沸點(diǎn)的非質(zhì)子性溶劑中，于微波輔助 條件下進(jìn)行快速衍生化反應(yīng)，所述衍生化試劑為N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-D-氨基酸類化 合物；

B)對(duì)衍生物采用非手性高效液相色譜或非手性高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分離測(cè)定。