[發(fā)明專利]鑒別大黃魚精子活力的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910045180.4
• 申請日: 2009-01-12
• 公開（公告）號: CN101776586A
• 公開（公告）日: 2010-07-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃曉榮;章龍珍;莊平;江琪;劉鑒毅;張濤;馮廣朋;趙峰;閆文罡
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 上海東方易知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 31121
• 代理人: 歐陽俊立

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類精子活力的檢測。

背景技術(shù)

魚類精子活力的好壞是反映受精率高低的重要指標之一，因此，在生產(chǎn)實踐中，客觀準確評價魚類精子的活力具有非常重要的理論意義與應(yīng)用價值。在評價魚類精子活力時，目前主要有以下幾種方法：

一、利用普通顯微鏡觀察記錄精子的活動狀況和運動時間，這種方法受人為因素的影響較大，不能客觀反應(yīng)精子的活動狀況；

二、利用魚類精子直接開展受精試驗，統(tǒng)計受精率、孵化率、出膜率等，這種方法受外界環(huán)境因子較多，且隨著不同魚類的早期發(fā)育時間的長短試驗周期會有較大變化；

三、用計算機輔助分析系統(tǒng)(CASA)分析精子的運動速率和運動距離，這種方法能客觀反應(yīng)精子的活動情況，但儀器設(shè)備昂貴。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種準確客觀鑒別大黃魚精子活力的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案配備試劑盒和紫外分光光度計，采集大黃魚的精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計下分別測定大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性，精子中ATP酶的活性高于60.16±5.88U/ml，CK的活性高于11.91±0.76U/ml，SDH的活性高于51±2.16U/ml，LDH的活性高于7806.44±110.11U/L，為精子活力較好；精子中ATP酶的活性介于3.54±0.37U/ml和60.16±5.88U/ml之間，CK的活性介于10.22±0.32U/ml和11.91±0.76U/ml之間，SDH的活性介于31.5±2.08U/ml和51±2.16U/ml之間，LDH的活性介于2654.13±70.06U/L和7806.44±110.11U/L之間，則精子活力一般；精子中ATP酶的活性低于3.54±0.37U/ml，CK的活性低于10.22±0.32U/ml，SDH的活性低于31.5±2.08U/ml，LDH的活性低于2654.13±70.06U/L，則精子活力差。

本發(fā)明的突出特點是研究了不同活力的大黃魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性有較大差別，提供了鑒別大黃魚精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)活性的相應(yīng)數(shù)據(jù)，并通過精子相關(guān)能量代謝酶活性檢測，根據(jù)酶活性的高低，并運用本方法提供的相應(yīng)數(shù)據(jù)來鑒別大黃魚精子的活力，具有準確客觀的顯著效果，鑒別準確率達到98％以上。

具體實施方式

本發(fā)明在大黃魚的繁殖季節(jié)，分批采集大黃魚的精子，每批次取5尾魚精子，采用魚類專用試劑盒(按照南京建成生物工程研究所公開的該產(chǎn)品操作指導(dǎo)書進行)在紫外分光光度計下分別測定不同批次精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，每個樣重復(fù)三次，結(jié)果取平均值，運用統(tǒng)計軟件對結(jié)果進行分析處理，如果精子中ATP酶的平均活性高于60.16±5.88U/ml，CK的平均活性高于11.91±0.76U/ml，SDH的平均活性高于51±2.16U/ml，LDH的平均活性高于7806.44±110.11U/L，則為精子活力好；如果精子中ATP酶的平均活性介于3.54±0.37U/ml和60.16±5.88U/ml之間，CK的平均活性介于10.22±0.32U/ml和11.91±0.76U/ml之間，SDH的平均活性介于31.5±2.08U/ml和51±2.16U/ml之間，LDH的平均活性介于2654.13±70.06U/L和7806.44±110.11U/L之間，則為精子活力一般；如果精子中ATP酶的平均活性低于3.54±0.37U/ml，CK的平均活性低于10.22±0.32U/ml，SDH的平均活性低于31.5±2.08U/ml，LDH的平均活性低于2654.13±70.06U/L，則為精子活力差。