[發(fā)明專利]衣霉素在制備腫瘤細胞逆轉藥物中的應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910044876.5
• 申請日: 2009-01-05
• 公開（公告）號: CN101530420A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設計）人: 鄒劍峰;侯健;姜華
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學
• 主分類號: A61K31/7072
• 分類號: A61K31/7072;A61P35/00
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司
• 代理人: 丁振英

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是一種利用衣霉素在制備腫瘤細胞逆轉藥物中應用的技術。

背景技術

眾所周知，百余年來，腫瘤的治療一直采用手術、放射及化學藥物治療，特別是對血液腫瘤包括骨髓瘤均采用敵我不分的聯(lián)合化療，其著眼點在于殺傷腫瘤細胞。1986年我國科學家在國際上首先應用全反式維甲酸誘導分化治療急性早幼粒細胞白血病獲得顯著效果，開創(chuàng)了誘導分化治療腫瘤的新紀元。誘導分化治療的提出，打破了“一旦成了癌細胞，便永遠是癌細胞”觀點。目前，惡性腫瘤的誘導分化治療已成為腫瘤生物學和腫瘤治療學的研究熱點和前沿領域，其作為惡性腫瘤的一種新型治療方法日益引起醫(yī)學工作者的關注和興趣。相比在急性早幼粒細胞白血病取得的顯著成果而言，在誘導分化治療多發(fā)性骨髓瘤及其他腫瘤的基礎研究領域十分薄弱，臨床研究尚處于空白。

衣霉素(tunicamycin)為放線菌Streptomyces?lysosuperficus產生的核苷酸抗生素。可抑制具有被膜(envelope，含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用機理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂(多萜醇，dolichol)中間產物的生成。又因為它可抑制在合成細菌細胞壁的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂(細菌萜醇，多聚萜醇)中間產物的形成，所以顯示對革蘭氏陽性菌的抗菌性。最近，利用這種抑制擬脂中間產物形成的作用，來探索糖類復合物的活體合成及其功能。衣霉素可以抑制高爾基體中n-乙酰葡糖胺酶功能，進而抑制蛋白質的糖基化，而誘導未折疊蛋白反應。衣霉素濃度在2μg/ml左右，經實驗發(fā)現其可以殺死胃癌、前列腺癌、乳腺癌細胞。(參見文獻Calnexin-dependent?regulation?of?tunicamycin?induced?apoptosis?inbreast?careinoma?MCF-7?cells，Delom?F，Emadali?A，Cocolakis?E?et?alCell?Death?and?Differentiation，2007；14：586-96；Tunicamycin?EnhancesTumor?Necrosis?Factor-Related?Apoptosis-Inducing?Ligand-InducedApoptosis?in?Human?Prostate?Cancer?Cells，Shiraishi?T，Yoshida?T，Nakata?S?et?al?Cancer?Res.2005；65：6364-70；衣霉素增強胃腺癌細胞對TRAIL誘導凋亡的敏感性，程文晉；吳萍；陳思等，安徽醫(yī)科大學學2008；43：119-123)

誘導分化治療腫瘤不同于傳統(tǒng)的細胞毒療法，不會因為“剿滅”腫瘤細胞而殃及正常細胞。不會對正常細胞尤其是處于增殖狀態(tài)的細胞，如正常骨髓、消化道、上皮組織等產生殺傷效應而導致諸如骨髓抑制、消化道反應、脫發(fā)、肝腎損害等嚴重的不良反應。因此制備腫瘤細胞逆轉藥物具有廣闊的應用前景。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供衣霉素的新的用途，即其在制備腫瘤細胞逆轉藥物中的應用。

通過實驗研究，在采用衣霉素低劑量的濃度條件下，通過適度修飾未折疊蛋白反應，可以誘導腫瘤細胞分化，使腫瘤細胞逆轉成為正常細胞，因此用衣霉素來制備腫瘤細胞逆轉藥物的技術可望在將來用于腫瘤的治療方面。

本發(fā)明提供了衣霉素在制備腫瘤細胞逆轉藥物中的應用。所采用的衣霉素是美國sigma公司合成的實驗試劑。通過體外實驗證明用低劑量的衣霉素，對惡性腫瘤細胞具有誘導分化的作用，惡性腫瘤細胞可逆轉為正常細胞，因而可用于制備腫瘤細胞逆轉藥物中的應用，復蘇實驗相關用的細胞株RPMI-8226骨髓瘤細胞系，U266骨髓瘤細胞系等。

本發(fā)明在實驗時設置一系列的濃度梯度，發(fā)現衣霉素濃度超過0.75μg/ml時表現為誘導凋亡的作用。因此本發(fā)明所采用的低劑量衣霉素濃度在0.1-0.5μg/ml，較佳的為0.25μg/ml、0.5μg/ml，用上述濃度的衣霉素處理骨髓瘤細胞系后，骨髓瘤細胞株形態(tài)上發(fā)生分化，表現為細胞向成熟漿細胞形態(tài)轉變，細胞分化抗原CD49e表過上調，分泌的免疫球蛋白輕鏈也增多。

本發(fā)明的優(yōu)點在于，衣霉素的藥物用量低，效果確切，用衣霉素制備腫瘤細胞逆轉藥物，不會因為“剿滅”腫瘤細胞而殃及正常細胞，因此對正常細胞的影響小，有利于改善腫瘤患者的生活狀態(tài)。

附圖說明

圖1為U266骨髓瘤細胞用衣霉素處理后形態(tài)變化顯微鏡下圖(400×)