[發明專利]果膠酶的工業化生產方法

有效

• 申請號: 200910044166.2
• 申請日: 2009-08-19
• 公開（公告）號: CN101659946A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 李忠興;郝志軍;焦志民;楊忠義
• 申請（專利權）人: 沅江浣溪沙麻業工程有限公司;李忠興
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26;C12R1/07
• 代理公司: 益陽市銀城專利事務所
• 代理人: 舒 斌;夏宗福

1.一種果膠酶的工業化生產方法，其特征是它包括菌種培養、搖瓶發酵、酶液制備等步驟，所述菌種即蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）、實驗室編號為MAPLE21，保藏號：CCTCC?NO：M?209147，其生物學特性為：菌體呈桿狀，染色均勻，G⁺、兼性需氧，形成芽胞，芽胞不突出菌體，菌體兩端較平整，多數呈鏈狀排列。

2.根據權利要求1所述的果膠酶的工業化生產方法，其特征是所述的菌種培養為CCTCC?NO：M?209147菌種在如下配制的斜面上生長良好，斜面培養基配方為：1000mL蒸餾水中，加入牛肉膏5g-10g，酵母膏5g-10g?，蛋白胨10g-15g，葡萄糖5g-10g?，氯化鈉5g-10g?,調pH值6.9－7.1，0.1MPa滅菌20分鐘－30分鐘，制成試管斜面，接種該菌種，33℃－35℃，培養18小時－24小時，備用。

3.根據權利要求1所述的果膠酶的工業化生產方法，其特征是所述的搖瓶發酵為CCTCC?NO：M?209147菌種在規定的培養條件下可產生高活力的果膠酶，這種培養條件是：培養基配方為麥麩6﹪－8﹪、玉米粉0.5﹪－1﹪、氮含量40﹪的玉米漿1﹪－2﹪、氯化鈉0.5﹪－0.8﹪、微晶纖維素1﹪－2﹪、水86.5﹪－91﹪，其中所述各組分之和為100﹪，滅菌前，調pH值為8.0-8.5，0.1MPa滅菌25分鐘－35分鐘，培養條件：33℃－35℃，轉速260?r/min?-280r/min，培養18小時-22小時。

4.根據權利要求1所述的果膠酶的工業化生產方法，其特征是所述的酶液制備為由茄瓶斜面到種子罐到發酵罐，二級發酵，其培養基配方為麥麩6﹪－8﹪、玉米粉0.5﹪－1﹪、氮含量40﹪的玉米漿1﹪－2﹪、氯化鈉0.5﹪－0.8﹪、微晶纖維素1﹪－2﹪、水86.5﹪－91﹪，其中所述各組分之和為100﹪，滅菌前，調pH值為8.0-8.5，0.1MPa滅菌25分鐘－35分鐘，裝罐總體積不超過70％；培養條件：溫度33℃－38℃，攪拌轉速180?r/min－220?r/min，通氣量以v/v?計：1：0.25?－0.55?，罐壓0.06?MPa－0.08MPa，培養周期：種子罐為7小時-8小時，發酵罐為12小時-16小時。

5.根據權利要求4所述的果膠酶的工業化生產方法，其特征是種子罐的培養條件：溫度36℃－38℃，攪拌轉速220?r/min，通氣量以v/v?計：?0小時－5小時，1?：0.40－0.46?、5小時以后1：0.50－0.55?；發酵罐的培養條件：溫度0小時－4小時，36℃－38℃，4小時以后33℃－35℃，攪拌轉速：0小時－4小時，180?r/min，4小時－6小時，200?r/min，6小時以后220?r/min，通氣量以v/v?計：0小時－4小時，1：0.25?－0.27，4小時－6小時，1?：0.33－0.36，6小時以后1：0.5－0.55?。

6.根據權利要求4所述的果膠酶的工業化生產方法，其特征是在酶液制備后，制備標準果膠酶液，將發酵醪液經過板框過濾、硅藻土除菌，經防腐處理得到在15℃、密封存放三個月條件下，酶活力保持率為95%以上的標準果膠酶液。