[發明專利]一種有特異靶向并具抗血吸蟲作用的蟲體膜結合短肽ZL-4及其應用

無效

• 申請號: 200910043720.5
• 申請日: 2009-06-19
• 公開（公告）號: CN101591378A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 曾慶仁;劉彥;魏琦
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C12N15/12;A61K38/10;A61P33/12;G01N33/68
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所
• 代理人: 顏 勇

技術領域

本發明屬于生物藥品或生物試劑領域，具體涉及一種有特異靶向性并具抗血吸蟲作用的蟲體膜結合短肽ZL-4及其應用。

背景技術

長期以來，對腫瘤和病原治療的藥物使用，一直存在一個共同的缺陷：藥物在體內使用，分布廣，代謝快，到達靶標部位濃度低，這不僅使藥物的生物利用度很低，而且更重要的是用低劑量藥物不能奏效，用高劑量藥物則會導致對全身的毒性作用，因此，人們早就提出——實現藥物靶向治療思路，即研發對腫瘤或病原有特異結合的分子作為靶向分子，用該分子與藥物偶聯后在人體使用，預期不僅可顯著提高藥物的生物利用度，更重要的是使藥物高濃度集中于靶標部位發揮其藥效作用，減低了藥物對機體全身的毒副反應。因此，前期靶向分子的獲取是十分重要的。目前，用于治療疾病的多肽生物分子很多，如治療糖尿病的胰島素、抗病原微生物的抗菌肽和抗腫瘤藥物的靶向多肽等。前二者已實現合成制備并被廣泛應用于臨床，后者尚屬起步階段，主要利用商品化的噬菌體肽庫來篩選獲得。血吸蟲病是世界70個國家有流行分布的主要熱帶病，在我國流行的日本血吸蟲病屬人畜共患蟲種，防治難度大，因此，盡管經歷50多年防治并取得很大成績，但它仍然在廣闊的湖洲地區流行傳播。其原因：預防人畜感染血吸蟲的疫苗尚未問世；抗蟲藥物(吡喹酮和青篙素類)不能解決重復感染問題，而且抗成蟲的藥物療效在下降，抗早期童蟲(感染后1-7d內)藥物尚未發現。因此，繼續探索抗蟲新藥和提高抗蟲效果的方法是當前血防研究的重要課題之一。

目前，研究報道比較多的是采用噬菌體隨機多肽庫，以抗體作為探針，來篩選獲得血吸蟲抗原模擬表位用于血吸蟲病疫苗或診斷試劑的研究[舒新華、易新元、曾憲芳等；日本血吸蟲病患者血清對噬菌體隨機7肽庫的免疫篩選；細胞與分子免疫學雜志；2000.16(2)：109-112.Ouyang?L，Yi?X，Zeng?X等.Partial?p?rotection?induced?by?phage?library-selected?peptidesmimicking?epitopes?of?Schistosoma?japonicum[J].Chin?Med?J(Engl)，2003，116(1)：138-141.Arnon?R，TarrabK-Hazdai?R，StewardM，et?al.A?mimotope?peptide?based?vaccineagainst?Schistosoma?mansoni：synthesis?and?characterization.Immunology，2000，101(4)：555-562.王欣之，傅志強，黃劭鵬，等.噬菌體展示日本血吸蟲Sj14單抗的模擬抗原表位及其免疫保護性研究.生物工程學報，2006，22(1)：119-124.]，亦有在疫苗研究方面提出免疫靶向概念，但該靶向分子則為特異性的抗體或單鏈抗體[何卓，汪世平，周帥鋒等.抗日本血吸蟲生殖功能分子SIEA26～28kDa單鏈抗體與EGFP的融合表達及靶向性研究，中國人獸共患病學報2008，24(8)：704-709]。

近年也有學者發現有特異性破壞血吸蟲RNA和DNA的垂頭狀核酶基因并證明具有抗血吸蟲作用，但當它單獨在體內使用時不能直接到達蟲體。如能找到理想的特異靶向分子與之偶聯，不僅可解決特異結合到蟲體發揮效應，還有可能達到提高抗蟲效果和減少毒副作用的目的。

研究具有特異性靶向性作用的分子包括：特異性抗體分子(雙鏈或單鏈)、配體分子和模擬配體的多肽分子或與離子通道結合的多肽分子。前二者(抗體和配體)具有抗原性，在異種生物體內應用具有抗原性，產生免疫反應所表現的副作用，顯然在體內使用不安全，而后者為多肽分子具有使用安全的特點。

發明內容

本發明目的：一是篩選獲得既具抗蟲作用(含影響蟲體生長發育)又可靶向抗蟲藥物功能的多肽生物分子，以期實現提高抗蟲效果、提高藥物在體內的生物利用度和減少其所致毒副反應；二是篩選獲得能與血吸蟲蟲體產生特異性結合的分子，不僅可用來研究抗蟲藥物-多肽靶向制劑，而且也可用作研究制備特異性基因核酶-多肽靶向系統，用于人、畜血吸蟲病治療。還有可能作為一種試劑或探針用于研究血吸蟲膜的生理特性(如離子通道)，亦有可能將該分子與放射性元素偶聯用來研究血吸蟲在宿主體內生長發育與移行的生物學規律。