[發明專利]一種生物催化轉化松果菊苷生產毛蕊花糖苷單體化合物的方法

無效

• 申請號: 200910041560.0
• 申請日: 2009-07-31
• 公開（公告）號: CN101619337A
• 公開（公告）日: 2010-01-06
• 發明（設計）人: 劉昕;徐運娟;趙爽;劉小卓;鐘倩莉;招淑燕;莊沿磊;黃建威;曾小紅
• 申請（專利權）人: 中山大學;深圳學者生物有限公司;廣州綠色盈康生物工程有限公司
• 主分類號: C12P19/44
• 分類號: C12P19/44;C07H15/18;C07H1/00
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1.一種利用生物催化轉化生產毛蕊花糖苷單體化合物的方法，以肉蓯蓉提取物作為催化反應底物，采用通常固定化酶工業生產中的吸附法固定方式，獲得β-葡萄糖苷酶工業酶制劑固定化酶作為生物催化劑，催化水解底物中的松果菊苷定向轉化為毛蕊花糖苷單體化合物；將反應液通過通常的分離提純及濃縮、干燥工藝，獲得毛蕊花糖苷單體化合物；所述的肉蓯蓉提取物是以肉蓯蓉肉質莖，經通常提取分離工藝獲取的肉從蓉提取物，其苯乙醇苷類化合物含量不低于3.2％；催化反應過程初始底物濃度為0.1％～30％；溫度為38℃～60℃；pH為4.0～5.8；時間為3.5h～10h；催化反應過程反應物中的β-葡萄糖苷酶活力為1U/g～1000U/g。

2.按照權利要求1所述的方法，其特征是該方法的具體步驟包括：

(1)、采用肉蓯蓉提取物作為催化反應底物，利用通常固定化酶工業生產中的吸附法固定方式，獲得β-葡萄糖苷酶工業酶制劑固定化酶作為生物催化劑，經通常工業固定化酶反應器進行催化反應，催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配體末端的一個葡萄糖基、定向轉化為毛蕊花糖苷單體化合物；催化反應過程初始底物濃度為0.1％～30％，溫度為38℃～60℃，pH為4.0～5.8，時間為3.5h～10h，催化反應過程反應物中的β-葡萄糖苷酶活力為1U/g～1000U/g；

(2)、采用通常工業膜分離工藝裝置超濾膜或陶瓷膜，選擇性篩分及截留除去經步驟(1)反應后的反應液中的多糖、蛋白質大分子雜質以及微粒和亞微粒雜質，或再通過納濾膜，進一步選擇性篩分及截留除去氨基酸、D-甘露醇、甜菜堿小分子雜質；獲得毛蕊花糖苷成分提取液；

(3)、將步驟(2)獲得的毛蕊花糖苷成分提取液，通過通常工業真空濃縮工藝或工業薄膜蒸發濃縮工藝，獲得固形物含量為30％～56％的濃縮物；再通過工業噴霧干燥工藝，或通常的其它工業干燥方法，獲得毛蕊花糖苷單體化合物的粉狀物或干燥物。

3.按照權利要求1或2所述的方法，其特征是催化反應過程初始底物濃度為1％～15％；溫度為42℃～50℃；pH為4.5～5.3；時間為4h～6h；催化反應過程反應物中的β-葡萄糖苷酶活力為10U/g～100U/g。

4.按照權利要求1或2所述的方法，其特征是催化反應過程中再添加K⁺、Na⁺、Mn²⁺或Co²⁺作為催化反應的激活劑，添加的激活劑在初始反應物中的濃度為0.1mol/L～3mol/L。

5.按照權利要求4所述的方法，其特征是添加的K⁺、Na⁺、Mn²⁺或Co²⁺激活劑在初始底物中濃度為0.5mol/L～1.5mol/L。

6.按照權利要求2所述的方法，其特征是在步驟(2)中再采用通常工業大孔樹脂吸附分離工藝，或/和通常工業層析柱分離純化工藝，或/和通常模擬移動床色譜分離系統工藝或通常多功能色譜分離工藝，進一步分離純化。

7.按照權利要求2所述的方法，其特征是步驟(2)中所述的超濾膜或陶瓷膜的相對分子質量為1000～4500；納濾膜相對分子質量為200～300。

8.按照權利要求1或2所述的方法，其特征是所述的β-葡萄糖苷酶工業酶制劑包括β-葡萄糖苷酶、纖維素酶、植物提取復合酶或/和植物水解復合酶。

9.按照權利要求2所述的方法，其特征是步驟(3)中所述的工業真空濃縮工藝或工業薄膜蒸發濃縮工藝的溫度為42℃～80℃，工業噴霧干燥工藝的干燥塔進風溫度為125℃～285℃，其它工業干燥的方法干燥溫度為50～100℃。

10.按照權利要求2所述的方法，其特征是步驟(3)中所述的工業真空濃縮工藝或工業薄膜蒸發濃縮工藝的溫度為45℃～65℃，工業噴霧干燥工藝的干燥塔進風溫度為135℃～185℃，其它工業干燥的方法干燥溫度為60～80℃。