[發明專利]IgY免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法

無效

• 申請號: 200910041330.4
• 申請日: 2009-07-22
• 公開（公告）號: CN101698680A
• 公開（公告）日: 2010-04-28
• 發明（設計）人: 陳文彪;趙肅清
• 申請（專利權）人: 廣東京豪醫藥科技開發有限公司
• 主分類號: C07K16/02
• 分類號: C07K16/02;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16
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1.一種卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征在于經過PEG沉淀和氯仿抽提后，將上述粗提的抗體沉淀經PBS溶解后直接上凝膠色譜柱。對純化后的IgY免疫球蛋白進行純度和殺菌性能測定。

2.根據權利要求1所述的卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征是，第一步粗提過程為：取蛋黃(去除蛋清和蛋黃膜)，加入PEG6000攪拌，可以去除卵黃中的脂蛋白。同時使用氯仿抽提，即加入1/4蛋黃體積的氯仿，充分攪拌混合均勻后，離心取上清。

3.根據權利要求1所述的卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征是，第二步凝膠層析過程為：根據溶質分子在流動相溶劑中的體積大小不同而達到分離的目的，我們將上述分離的IgY抗體經PBS稀釋后直接上Sephadex?G-75柱子。通過凝膠色譜層析后可以得到高純度的IgY抗體。

4.根據權利要求1所述的卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征是，經過抗體粗提和凝膠色譜層析后，對純化的IgY抗體進行純度和殺菌性能測定。

5.根據權利要求4所述的卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征是，通過SDS-PAGE凝膠電泳鑒定純化后抗體的純度。

6.根據權利要求4所述的卵黃免疫球蛋白的PEG與凝膠色譜聯用純化方法，其特征是，取適量的此IgY卵黃抗體與適當濃度的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌共同倒平板培養，通過抑菌圈的大小檢測IgY抗體的殺菌活性。