[發明專利]檢測水痘-帶狀皰疹病毒的試劑盒有效
| 申請號: | 200910038861.8 | 申請日: | 2009-04-22 |
| 公開(公告)號: | CN101871013A | 公開(公告)日: | 2010-10-27 |
| 發明(設計)人: | 李明;陳嘉昌;陳華云 | 申請(專利權)人: | 中山大學達安基因股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 510665 廣東省廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 水痘 帶狀 皰疹病毒 試劑盒 | ||
1.一種檢測樣品中水痘-帶狀皰疹病毒的試劑盒,(1)分別裝有DNA提取液、PCR擴增反應液、陰性對照樣品、陽性定量參考品并加蓋密封的多個試劑瓶或管,和(2)分隔并集中包裝這些試劑瓶或管的包裝盒,PCR擴增反應液包括正向引物、反向引物、寡核苷酸探針、dNTPs、耐熱DNA聚合酶、PCR緩沖液和水,其特征在于所使用的引物序列分別為:5’-CCGTTTTGCATTGGATTCGTA-3’、5′-TTTTCAAGAAGCGCCTTTGC-3′,寡核苷酸探針序列為:5’-TCACGTCCGCCGCGGACA-3’。
2.根據權利要求1的試劑盒,其特征在于PCR擴增反應液所使用的正反向引物的序列還可以為:5’-ACGACCGGCGCTGAGATA-3’、5′-CAATGCCGTGACCACCAA-3′,寡核苷酸探針序列還可以為:5’-CACCCGCCTTGGATTAGAGCCAGAAAA-3’。
3.根據權利要求1的試劑盒,其特征在于PCR擴增反應液所使用的正反向引物的序列還可以為:5’-GGGTCAACTGTCCCTGGTCTT-3’、5’-GTTCCCATGTTTTATGGGAATACC-3’,寡核苷酸探針序列還可以為:5’-AACGACCCCCCGAAGATGACGAACT-3’。
4.根據權利要求1的試劑盒,其特征在于PCR擴增反應液所使用的正反向引物的序列還可以為:5’-TAGTCAGGCCATGAGTCATCGT-3’,5’-GGCAAGTCGCCAATTAACGT-3’,寡核苷酸探針序列為:5’-CGACATGCAGTCAATTTCAACGTCGC-3’。
5.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于PCR緩沖液包含10mM?Tris-HCl(pH8.0)、150mMKCl、5mM?MgCl2,每微升的PCR緩沖液中加入1單位Taq酶。
6.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于陽性定量參考品為攜帶有VZV核酸序列的重組質粒,質粒由上下游引物擴增的PCR產物通過市售的載體克隆構建而成,所使用的上下游引物的序列組合可以是SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2,或SEQ?ID?NO:4和SEQ?ID?NO:5,或SEQ?ID?NO:7和SEQ?ID?NO:8,或SEQ?ID?NO:10和SEQ?ID?NO:11。
7.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于試劑盒的核酸擴增系統是采用聚合酶鏈反應,并且所說的擴增反應循環是重復30-50次的聚合酶鏈反應循環。
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