[發(fā)明專利]一種脫落細胞保存液

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910037434.8
• 申請日: 2009-02-26
• 公開（公告）號: CN101485303A
• 公開（公告）日: 2009-07-22
• 發(fā)明（設計）人: 陳文武
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州鴻琪光學儀器科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 廣州市一新專利商標事務所有限公司
• 代理人: 王德祥;施性清

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及一種脫落細胞保存液。

背景技術(shù)

活細胞具有生理功能、生物學活性和固有的細胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)，在很多方面具有應用價值。但若將其脫離原來的生存環(huán)境放置，細胞的生理功能、生物學活性及固有的細胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)就會發(fā)生改變，常規(guī)的方法就是對脫落的細胞進行冷凍保存，而冷凍保存需要專門的冷凍設備，比較昂貴，而且，由于冷凍、解凍過程中存在對細胞損傷的危害，從而導致細胞變異或變形，影響后續(xù)工作。

由此，市場上出現(xiàn)了專門用于脫落細胞保存的溶液，如美國新柏氏(Tinpreper?TCT)生產(chǎn)的保存液(PresetverCyt^TM)，該保存液是與機器Tinpreper—2000配套使用的試劑，價格昂貴。為降低應用成本，研究人員開發(fā)了一種新的保存液配方，參考申請?zhí)枮?00610017591.9的中國發(fā)明申請公開《脫落細胞保存液》(公開號：CN1834233A)，該申請的保存液由以下成分組成，按體積份計：甲醇或乙醇40份～60份、磷酸鹽緩沖液或三羥甲基氨基甲烷鹽酸緩沖液20份～40份、甲醛或丙酮5份～10份、乙二胺四乙酸二鉀或乙二胺四乙酸二鈉5份～10份。

該技術(shù)領域的專利文獻又可以參考申請?zhí)枮?00680042980.5的中國發(fā)明申請公開《細胞保存用水溶液》(公開號：CN101310009A)，該水溶液包括增稠劑、防冷凍劑、糖，但不含天然動物源組分，如血清和基礎培養(yǎng)基等。還可以參考申請?zhí)枮?00710050463.9的中國發(fā)明申請公開《脫落細胞保存固定液及細胞薄層涂片的制作方法》(公開號：CN101182506A)，脫落細胞保存液包括下述配比以體積份計的組分：甲醇10-15份；乙醇10-15份；丙三醇1-2份；聚乙二醇1-2份；甲醛10-12份；冰醋酸0.5-1份；質(zhì)量濃度為0.85-0.9％的氯化鈉10-20份；磷酸緩沖液33-68.5份。該保存液具有細胞固有效果好、細胞粘片率高的特點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對上述的技術(shù)現(xiàn)狀而提供一種細胞保存率高、保存時間長的脫落細胞保存液。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種脫落細胞保存液，其特征在于包括pH緩沖劑、滲透壓維持劑、防腐保鮮劑、用于維持細胞形態(tài)的固定劑、抗凝劑、黏液軟化劑、保濕劑及破壞紅細胞的成分。

作為優(yōu)選，所述的pH緩沖劑pH值為6.5～7.4。

作為優(yōu)選，所述的pH緩沖劑為的PBS、Tris?HCl或PIPES中的至少一種；

所述的滲透壓維持劑為氯化鈉溶液；

所述的防腐保鮮劑為苯甲酸鈉鹽、苯甲酸鉀鹽中的至少一種；

所述的固定劑為無水乙醇、甲醇、多聚甲醛、丙酮、香豆素中的至少一種；

所述的抗凝劑為乙二胺四乙酸二納、乙二胺四乙酸二鉀、肝素中的至少一種；

所述的黏液軟化劑為蛋白酶K；

所述的保濕劑為石炭酸；

所述的破壞紅細胞的成分為碳酸氫鈉、磷酸三鈉中的至少一種。

作為優(yōu)選，包括如下組分和重量百分比：

氯化鈉????????0.5％～0.9％

碳酸氫鈉??????0.1％～0.5％

磷酸三鈉??????0.1％～0.5％

抗凝劑????????5％～10％

防腐保鮮劑????1％

蛋白酶K：?????0.1～0.5％

多聚甲醛??????1％～4％

香豆素????????1％～4％

石碳酸????????1％～5％，

還添加有如下組分和體積百分比比：

pH緩沖劑??????50％～70％

無水乙醇??????12％～20％

甲醇??????????10％～15％

丙酮??????????1％～4％，

其中，所述的抗凝劑為乙二胺四乙酸二納、乙二胺四乙酸二鉀、肝素中的一種，所述的防腐保鮮劑為苯甲酸鈉鹽、苯甲酸鉀鹽中的一種，所述的pH緩沖劑為PBS、Tris?HCl或PIPES中的一種。