[發明專利]利用混合菌種提高天然牧草生產燃料乙醇利用率的方法

無效

• 申請號: 200910032021.0
• 申請日: 2009-07-07
• 公開（公告）號: CN101591679A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 李建龍;趙蕓晨;范娟;余醉
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C12P7/10
• 分類號: C12P7/10;C10L1/02;C12R1/645;C12R1/01;C12R1/885;C12R1/685
• 代理公司: 南京知識律師事務所
• 代理人: 胡錫瑜

1.一種提高天然多年生牧草及其雜類草生產綠色可再生生物質燃料乙醇利用效率的方法，其 特征是由多年生木質素降解菌與纖維素降解菌混合后經初篩、復篩、優化與工程制備而成， 具體由以下步驟構成：

(1)混合菌種初選：在PDA固態培養基上，經過大量試驗，初步選擇能夠進行混合的多年 生木質素降解菌與纖維素降解菌混合菌組，以PDA培養基為基礎培養基，將斜面菌種 培養7天，觀察菌種在PDA培養基上的生長速度、生長外觀、菌種間相互作用及協作 性的表現，最后選擇適宜性、協同性強的雜色云芝與綠色木霉菌種、綠色木霉與黑曲 霉二種組合，作為優化適宜混合菌種工程菌制備材料；

(2)固態發酵復選：利用固態發酵培養基，將能夠混合的二組優化混合菌種，固態發酵測 定木質素降解酶活性、纖維素降解酶活性、天然牧草中三素含量的變化，篩選能夠協同 配合固態發酵的混合菌種，其中雜色云芝與綠色木霉混合后，木質素降解酶活性提高， 木質素降解率有極大的提高，綠色木霉與黑曲霉混合后，纖維素酶活性明顯提高；

(3)固態發酵培養優化：將混合菌種與單一菌種所產生的降解酶的種類與降解酶活性的高低 進行對比，優選所產生的降解酶活性強，多年生木質纖維類物質降解率高的混合優化二 個組合，進一步觀察其混合生長及協同互效降解效果；

(4)優化菌種組合工程制備：將所篩選出的二個優化適宜的混合菌種經過擴大培養成為具 有一定數量和質量的生產菌種，以作為進一步擴大菌體量及合成產物之用，其工程制備 包括孢子制備和菌絲體制備。

2.根據權利要求1所述一種提高天然多年生牧草及其雜類草生產綠色可再生生物質燃料乙 醇利用效率的方法在天然牧草生產燃料乙醇中的應用。