[發明專利]一種添加乙醇和/或過氧化氫脅迫枯草芽孢桿菌發酵產過氧化氫酶的方法

無效

• 申請號: 200910030830.8
• 申請日: 2009-04-17
• 公開（公告）號: CN101525601A
• 公開（公告）日: 2009-09-09
• 發明（設計）人: 陳堅;姚丹丹;李江華;華兆哲
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/08
• 分類號: C12N9/08;C12R1/125
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1、一種添加乙醇和/或過氧化氫脅迫枯草芽孢桿菌Bacillus?sp.WSHDZ-01發酵產過氧化氫酶的方法，其特征是利用Bacillus?sp.WSHDZ-01為生產菌株，通過在培養基中添加乙醇和/或過氧化氫，脅迫菌體產過氧化氫酶；添加方式為：

在發酵開始后0h、12h、36h分批添加培養基中體積濃度達1.0％的乙醇，總酶活達15000U·mL^-1；3L罐上采取不同的乙醇添加策略使CAT酶活大幅提高：分階段恒速流加體積濃度5％的乙醇，滴加速度為：0-12h以4.13mL/h，12-36h以10.05mL/h?36h至發酵結束以11.42mL/h滴加；或0h、12h、36h分批添加培養基中體積濃度達1.0％的乙醇；或0h一次性添加培養基中體積濃度達1.0％的乙醇；CAT最高酶活分別達28000U·mL^-1，25000U·mL^-1和22000U·mL^-1；

或在發酵開始后12h在培養基中添加培養基中體積濃度達0.3％的H₂O₂，總酶活達9200U·mL^-1；3L罐上在發酵開始后12h一次性添加培養基中體積濃度達0.3％的H₂O₂，酶活可達21600U·mL^-1，或12h、24h分批添加培養基中體積濃度達0.15％的H₂O₂，總酶活達23000U·mL^-1；

或在3L罐上分階段恒速流加體積濃度5％的乙醇，滴加速度為：0-12h以4.13mL/h，12-36h以10.05mL/h，36h至發酵結束以11.42mL/h滴加和同時在12h、16h、20h、24h、28h分批添加培養基中體積濃度達0.06％的H₂O₂；總酶活達19000U·mL^-1，其中胞外酶活達15700U·mL^-1，占總酶活的82.6％，發酵時間縮短到42h。