[發明專利]栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法

無效

• 申請號: 200910029469.7
• 申請日: 2009-04-14
• 公開（公告）號: CN101536673A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 李霞;閻麗娜;周月蘭
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司
• 代理人: 孫忠浩

1.一種栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法，水稻的愈傷組織誘導培養基、繼代培養基、分化培養基和幼苗壯根培養基均在高壓滅菌前調整pH值為5.8～6.1；愈傷組織誘導、繼代、分化和幼苗壯根均在試管中完成，培養過程中的環境溫度為28℃～30℃，其特征在于：

外植體為水稻種子；

愈傷組織誘導培養基以M8的大量元素、有機成分、微量元素的基本成分為基礎，再分別添加質量比為3％的白砂糖、0.8％的瓊脂條、0.5％的山梨醇、1～2mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸、1mg/L的脫落酸，0.3～2.0mg/L的6-芐基腺嘌呤和0.2mg/L的激動素；

繼代培養基以M8的大量元素、有機成分、微量元素、鐵鹽為基本組分，添加質量比3％的白砂糖、0.8％的瓊脂條、0.5～1mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸和0.1～0.2mg/L的激動素；

分化培養基以MS的大量元素、有機成分、微量元素的基本成分為基礎，添加1g/L的活性炭、8g/L的瓊脂條、30g/L的白砂糖、0.5mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸和1mg/L的苯基脲類細胞分裂素；

幼苗壯根培養基以1/2MS基本成分為基礎，添加15g/L的白砂糖、10g/L的瓊脂條、0.2mg/L的萘乙酸和0.4mg/L的多效唑；

在愈傷誘導培養的前7天全暗培養，之后轉入光下培養，獲得愈傷組織；選取淺黃色、干燥、顆粒狀愈傷組織轉入繼代培養基光下培養；然后選取蓬松狀愈傷組織轉入分化培養基上光下培養；再選取含綠芽的顆粒狀愈傷組織轉入幼苗壯根培養基繼續培養，長成3片葉且根系發達后，形成健壯試管植株。

2.根據權利要求1所述的栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法，其特征在于：愈傷組織誘導培養耗時28～35天；繼代培養、分化培養和幼苗壯根培養分別耗時14～21天；在愈傷組織誘導、繼代、分化和幼苗壯根期間的光下培養期間，光照時間為12～14h/d，光強為1800～2100Lux。

3.根據權利要求1所述的栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法，其特征在于：所述的水稻為秈稻，愈傷組織誘導培養基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量為1mg/L，6-芐基腺嘌呤的添加量為1.5～2mg/L。

4.根據權利要求1所述的栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法，其特征在于：所述的水稻為粳稻，愈傷組織誘導培養基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量為2mg/L，6-芐基腺嘌呤的添加量為0.3～0.6mg/L。

5.根據權利要求1所述的栽培水稻成熟胚高頻植株再生方法，其特征在于：所述的水稻為雜交稻，愈傷組織誘導培養基中的2，4-二氯苯氧乙酸的添加量為1～2mg/L，6-芐基腺嘌呤的添加量為0.6～1.5mg/L。