[發明專利]異檸檬酸測定試劑(盒)及異檸檬酸濃度測定方法

無效

• 申請號: 200910028521.7
• 申請日: 2009-02-04
• 公開（公告）號: CN101793756A
• 公開（公告）日: 2010-08-04
• 發明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N35/00;C12Q1/32;C12Q1/527
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種酶倍增法、酶比色法及酶聯法的異檸檬酸的濃度測定方法，其方法如下：

異檸檬酸+輔酶??異檸檬酸脫氫酶??二氧化碳+酮戊二酸+還原型輔酶

二氧化碳+腺苷三磷酸+生物素-羧基-攜帶蛋白????生物素羧化酶

?????????????????腺苷二磷酸+磷酸根+羧基生物素-羧基-攜帶蛋白

磷酸根+甘油醛-3-磷酸+輔酶??甘油醛-3-磷酸脫氫酶

??????????????????????????????甘油酸-1，3-雙磷酸+還原型輔酶

將最終反應物置于紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀下，檢測主波長340nm吸光度上升的程度，測算出異檸檬酸的濃度大小測定結果。

2.一種異檸檬酸測定試劑(盒)，主要成分包括：

緩沖液???????????????????????20——500mmol/L

穩定劑???????????????????????1——4000mmol/L

輔酶?????????????????????????1——6mmol/L

異檸檬酸脫氫酶???????????????1000——80000U/L

生物素羧化酶?????????????????1000——80000U/L

甘油醛-3-磷酸脫氫酶??????????1000——80000U/L

腺苷三磷酸???????????????????1——50mmol/L

生物素-羧基-攜帶蛋白?????????1——50mmol/L

甘油醛-3-磷酸????????????????1——50mmol/L

試劑成分的濃度不一定只限于上述范圍；在此范圍內效果較好，在此范圍外，試劑仍會反應作用。

其特征在于：試劑(盒)可以是干粉狀態，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

3.根據權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸組成單劑試劑。

4.根據權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、輔酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶組成。輔酶、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩定劑、輔酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸組成；試劑2，由緩沖液、穩定劑、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶組成；試劑3，由緩沖液、穩定劑、異檸檬酸脫氫酶組成。輔酶、異檸檬酸脫氫酶、生物素羧化酶、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、腺苷三磷酸、生物素-羧基-攜帶蛋白、甘油醛-3-磷酸在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：還包括穩定劑1-4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩定劑為：硫酸銨(AmmoniaSulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。