[發(fā)明專利]異檸檬酸測定試劑(盒)及異檸檬酸濃度測定方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910028222.3
• 申請日: 2009-02-04
• 公開（公告）號: CN101793710A
• 公開（公告）日: 2010-08-04
• 發(fā)明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N35/00;C12Q1/32
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種酶倍增法、酶比色法及酶聯(lián)法的異檸檬酸的濃度測定方法，其方法如下：

異檸檬酸+輔酶??異檸檬酸脫氫酶??二氧化碳+酮戊二酸+還原型輔酶

二氧化碳+乙酸+亞鐵細胞色素b1??丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)??丙酮酸

????????????????????????????????????????????+高鐵細胞色素b1+水

丙酮酸+輔酶A+輔酶??丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)??二氧化碳+

??????????????????????????????????????????乙酰輔酶A+還原型輔酶

將最終反應物置于紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀下，檢測主波長340nm吸光度上升的程度，測算出異檸檬酸的濃度大小測定結果。

2.一種異檸檬酸測定試劑(盒)，主要成分包括：

緩沖液???????????????????????????20——500mmol/L

穩(wěn)定劑???????????????????????????1——4000mmol/L

輔酶?????????????????????????????1——6mmol/L

異檸檬酸脫氫酶???????????????????1000——80000U/L

丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)?????????1000——80000U/L

丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)????????1000——80000U/L

乙酸?????????????????????????????1——50mmol/L

亞鐵細胞色素b1???????????????????1——50mmol/L

輔酶A????????????????????????????1——50mmol/L

試劑成分的濃度不一定只限于上述范圍；在此范圍內(nèi)效果較好，在此范圍外，試劑仍會反應作用。

其特征在于：試劑(盒)可以是干粉狀態(tài)，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液體試劑，直接使用。

3.根據(jù)權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩(wěn)定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A組成單劑試劑。

4.根據(jù)權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩(wěn)定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A組成雙劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、輔酶、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)組成。輔酶、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A在試劑1或試劑2中的位置可以不限。

5.根據(jù)權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：

由緩沖液、穩(wěn)定劑、輔酶、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A組成多劑試劑；試劑1，由緩沖液、穩(wěn)定劑、輔酶、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A組成；試劑2，由緩沖液、穩(wěn)定劑、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC1.2.1.51)組成；試劑3，由緩沖液、穩(wěn)定劑、異檸檬酸脫氫酶組成。輔酶、異檸檬酸脫氫酶、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.2.2)、丙酮酸脫氫酶(EC?1.2.1.51)、乙酸、亞鐵細胞色素b1、輔酶A在試劑1、試劑2或試劑3中的位置可以不限。

6.根據(jù)權利要求2所述異檸檬酸測定試劑(盒)，其特征在于：還包括穩(wěn)定劑1-4000mmol/L或0.1％-100％體積比。所述穩(wěn)定劑為：硫酸銨(AmmoniaSulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene?Glycol)、乙二醇(Ethylene?glycol)及防腐劑中的至少一種。