[發明專利]腦腫瘤組織塊動物原位接種手術方法及其接種針

無效

• 申請號: 200910027600.6
• 申請日: 2009-05-19
• 公開（公告）號: CN101569564A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發明（設計）人: 黃強;李如軍;刁藝;趙耀東;董軍;蘭青
• 申請（專利權）人: 蘇州大學附屬第二醫院
• 主分類號: A61D1/02
• 分類號: A61D1/02
• 代理公司: 蘇州市新蘇專利事務所有限公司
• 代理人: 許鳴石

技術領域

本發明涉及醫學研究中腦腫瘤模型建立的領域，尤其是涉及一種腦腫瘤組織塊動物原位接種手術方法，以及用于該方法的腦腫瘤組織塊動物原位接種針。

背景技術

在醫學研究，尤其是在腦腫瘤的研究中，建立合格的腦腫瘤動物模型對進一步的科學研究非常必要。目前，世界范圍內的腦腫瘤研究領域的科學家主要用三種方法建立相應的動物模型：

(1)是將體外長期傳代培養的腦腫瘤細胞在立體定向儀輔助下注入動物的腦內；

(2)是將新鮮的腦腫瘤的組織塊通過化學方法消化成為單細胞懸液后再注入動物腦中；

(3)通過手術打開動物顱骨后，暴露手術范圍，將腦腫瘤組織塊植入動物腦內。

這三種方法都有自己的不足之處。第一種方法接種的細胞因為長期在體外生長，難免發生變異，失去親本性，模擬性不盡人意；第二種因從組織塊變成單細胞懸液過程中許多細胞的活性受到影響，難以保證注入到腦內的活細胞數量，因此接種成功率難以保證，同時，由于原有的腫瘤組織結構被消化后失去其腫瘤組織的結構特點，模擬性不足；第三種方法可以實現動物腫瘤模型的高模擬性，但由于打開顱骨是創傷很大的手術，術后動物死亡率很高，限制了其應用。

發明內容

本發明的目的是：提供一種腦腫瘤組織塊動物原位接種手術方法，它能保證接種腫瘤組織原有的組織結構特性，為腫瘤研究提供了高模擬度的腫瘤模型；能保證接種細胞的活力，腫瘤移植成功率高。

本發明的另一個目的是：提供一種腦腫瘤組織塊動物原位接種針，它使用于腦腫瘤組織塊動物原位接種手術方法中，能保證接種腫瘤組織原有的組織結構特性，為腫瘤研究提供了高模擬度的腫瘤模型；能保證接種細胞的活力，腫瘤移植成功率高。

本發明的方法的技術方案是：一種腦腫瘤組織塊動物原位接種手術方法，該方法包括以下步驟：

(a)、取腦腫瘤組織，剪切成腫瘤組織碎粒；

(b)、將腫瘤組織碎粒置入組織塊注射針的針管中；

(c)、麻醉動物，解剖動物頭顱表面的皮膚，在動物顱骨上鉆孔；

(d)、沿顱骨孔插入組織塊注射針，并緩慢注入腫瘤組織碎粒；

(e)、緩慢拔針，骨蠟封閉顱骨孔，縫合頭皮。

所述步驟(a)中，采用醫用小剪刀將腦腫瘤組織剪成腫瘤組織碎粒。

所述步驟(b)中，包括對置入組織塊注射針針管中的腫瘤組織碎粒進行可量化的留置控制。

所述步驟(b)中，包括以下細分步驟，

(i)將腫瘤組織碎粒置入組織塊注射針的漏斗口；

(ii)使用推進器向組織塊注射針內擠壓，使腫瘤組織碎粒緊密的擠入注射針的針管中，多余的腫瘤組織碎粒從針管前端溢出；

(iii)在組織塊注射針針管內置入針芯，并用針芯的繼續推擠針管中的腫瘤組織碎粒，再根據組織塊注射針針管標示的刻度量化留置于針管中的腫瘤組織碎粒的體積。

所述腫瘤組織碎粒的體積可通過換算公式計算出腫瘤細胞數量。

所述步驟(c)中，根據動物頭顱表面標志物，在指定部位用微型顱鉆在動物顱骨上鉆孔。

所述步驟(d)中，在沿顱骨孔插入組織塊注射針之前，還包括在組織塊注射針針管外套用于控制組織塊注射針插入顱內深度的外套管。

所述步驟(d)中，組織塊注射針沿顱骨孔垂直插入。

本發明的接種針的技術方案是：一種腦腫瘤組織塊動物原位接種針，它包括組織塊注射針，所述組織塊注射針包括有針管、針管前端以及位于針管尾端的漏斗口，所述針管上標示有可量化腫瘤組織碎粒體積的刻度。

所述針管外部還套設有用于控制組織塊注射針插入顱內深度的外套管。

本發明的優點是：

1.實現了接種腫瘤組織內細胞數量的定量化。

2.實現了腫瘤組織動物腦內接種的定位：通過動物體表標志物確定注射平面，通過外套管的長度確定注射深度。

3.接種的腫瘤組織未經化學物質消化，保證了接種細胞的活力，進而保證了腫瘤的移植成功率，經過訓練的操作手其移植成功率可達100％。

4.保證了接種腫瘤組織原有的組織結構特性，為腫瘤研究提供了高模擬度的腫瘤模型。

5.因為本發明無須立體定向儀輔助，使得操作時間短，一次實驗可以完成數十只動物接種，滿足了一次實驗需大量動物模型的要求。

附圖說明

下面結合附圖和實施例對本發明作進一步的描述：

圖1為本發明步驟(b)的將腫瘤組織碎粒置入組織塊注射針漏斗口的示意圖；

圖2為本發明步驟(b)的推進器向組織塊注射針內擠壓的示意圖；