[發明專利]一種固定化纖維素酶及應用其水解植物材料提取活性成分的方法

無效

• 申請號: 200910024743.1
• 申請日: 2009-02-09
• 公開（公告）號: CN101550411A
• 公開（公告）日: 2009-10-07
• 發明（設計）人: 周建芹
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C07G99/00;C07C69/732
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司
• 代理人: 陶海鋒

1.一種固定化纖維素酶，其特征在于：所述固定化纖維素酶的載體為N-琥珀酰殼聚糖，通過交聯劑將纖維素酶共價交聯在N-琥珀酰殼聚糖載體上，得到N-琥珀酰殼聚糖固定化纖維素酶；所述N-琥珀酰殼聚糖的取代度＞0.6；所述纖維素酶選自：綠色木霉、黑曲霉或鐮刀霉纖維素酶中的一種。

2.根據權利要求1所述的一種固定化纖維素酶，其特征在于：所述交聯劑選自：戊二醛、溴化氰、對甲苯磺酰氯、表氯醇、均三嗪或氯化亞砜中的一種。

3.根據權利要求1所述的一種固定化纖維素酶，其特征在于：N-琥珀酰殼聚糖與纖維素酶的質量比為100∶1～20。

4.一種使用固定化纖維素酶水解植物材料提取活性成分的方法，包括以下步驟：

(1)將植物材料干燥磨成粉末，加入溶液D中，然后用固定化纖維素酶對植物材料細胞壁進行酶解處理；(2)回收固定化酶；(3)加入乙醇提取活性成分；

其特征在于：

(1)步驟(1)所述溶液D為pH4～5的緩沖溶液；固定化纖維素酶為權利要求1所述的N-琥珀酰殼聚糖固定化纖維素酶；

(2)步驟(2)為：調節pH，使溶液pH值≤3，使固定化酶以凝膠狀態析出并分離出來。

5.根據權利要求4所述的一種使用固定化纖維素酶水解植物材料提取活性成分的方法，其特征在于：步驟(1)中用固定化纖維素酶對植物材料細胞壁進行酶解處理的溫度為40～50℃，時間為2～4h。

6.根據權利要求4所述的一種使用固定化纖維素酶水解植物材料提取活性成分的方法，其特征在于：步驟(1)中N-琥珀酰殼聚糖固定化纖維素酶的總活力為19～55u。

7.根據權利要求4所述的一種使用固定化纖維素酶水解植物材料提取活性成分的方法，其特征在于：所述溶液D選自乙酸-乙酸鈉緩沖液、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中的一種。