[發明專利]一種杜仲葉中提取綠原酸的方法及其應用

無效

• 申請號: 200910024532.8
• 申請日: 2009-02-10
• 公開（公告）號: CN101486651A
• 公開（公告）日: 2009-07-22
• 發明（設計）人: 張東升;張凌裳;趙春城;周群蘭;謝俊;趙曉聯;杜郭君;王紅連;秦海萍;蔡建榮;蔡正森;龔燕
• 申請（專利權）人: 江蘇省蘇微微生物研究有限公司
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;A23K1/17;A61K31/216;A61P31/04;C12S3/00
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 殷紅梅

技術領域

本發明公開了一種杜仲葉中提取綠原酸的方法，本發明還公開了一種綠 原酸在魚病防治物中的應用。

背景技術

杜仲(Eucommia?ulmoides)在我國是一種具有2000多年歷史的中藥材， 其功效為補肝腎，強筋骨，安胎等；同時杜仲對治療高血壓癥有特效。綠原 酸為杜仲葉主要有效成分之一，具有顯著的生理活性。綠原酸為咖啡酰奎尼 酸衍生物，具有利膽、抗菌、抗病毒、降壓、升高白細胞及興奮中樞神經系 統等多種藥理作用，是保健食品、藥品、化妝品等工業的重要原料。綠原酸 多從植物中提取，以往國內外提取綠原酸主要從生咖啡豆和金銀花中獲得。

杜仲葉為杜仲科落葉喬木杜仲的葉子，其綠原酸含量為1％～5.5％，一 直以來人們都是以杜仲皮入藥，而葉子往往被廢棄。現代醫學研究證實了杜 仲葉與皮的化學成分基本一致，具有同等功效，可以以葉代皮。我國杜仲資 源儲備豐富，廣泛分布于長江、黃河中上游地區，干葉年產量相當大，完全 能夠滿足魚飼料中添加的要求。以杜仲葉為原料提取綠原酸具有廣闊的開發 前景。

在馬希漢等所撰寫的“從杜仲葉中提取綠原酸純品的研究”(參見《西北 林學院學報》1996，11(2)：58-60)，采用氯仿脫脂、化學萃取、無機鹽析， 此工藝方法未能有效的去除杜仲葉中的雜質(如蛋白質、膠質、纖維素)，使 綠原酸很難溶出，且只適用于實驗室小劑量制備。在王洪武等所撰寫的“杜 仲葉中綠原酸類物質的提取研究”(參見《江西師范大學學報》)(自然科學版) 1977，21(4)：339-341)中，采用的是溶劑提取、堿性Pb(OAc)和KOAc 沉淀，再溶解萃取重結晶制得，但鉛會在綠原酸產品中存有殘留，含鉛提取 液會對環境造成不良影響，因此，該方法不適宜工業化大規模生產。在戚向 陽等撰寫的《杜仲葉綠原酸的提取、分離和鑒定》(參見《植物資源與環境》 1998，7(1)：61-62)中，采用水浸提、101樹脂分離、有機溶劑萃取純化， 其綠原酸的含量僅為24.33％。以上工藝技術未對綠原酸提取、純化過程中的 各種影響因素沒有給以綜合考慮和解決，且要求達到99％以上的含量，生產 成本大和有的并未達到工業化生產的規模。專利98112603.0“一種魚杜仲飼 料的生產方法”是將杜仲葉直接粉碎后添加飼料中，且添加量在5-8％，添加 量過大，不僅影響了飼料的營養配比，而且還在一定程度上影響了飼料產品 外觀和適口性(呂武興“杜仲飼料添加劑應用研究現狀與展望”(參見《飼料 世界》2004年4期)。專利200410045040.4“杜仲飼料添加劑”主要是以杜 仲葉的提取物為全部添加，而2000年王紀亭等在“杜仲葉對肉雞生產性能影 響的研究”一文中表明在肉仔雞日糧中添加杜仲提取物，對肉仔雞全期生長 并無顯著影響。這可能是由于杜仲有效成分中的黃酮類化合物，對許多酶的 活性有抑制作用(參見《國外醫藥》1998彭芳“黃酮類化合物的生物活性”) 能抑制動物的生長，降低其飼料的利用率。本發明主要以杜仲葉中綠原酸活 性成分為添加物。

發明內容

本發明的目的之一是克服現有技術中存在的不足，提供一種工藝操作簡 便、成本低、無有害溶劑、得率高、適用于工業化生產的杜仲葉中提取綠原 酸的方法。

本發明的另一目的是提供一種綠原酸在魚病防治物中的應用。

按照本發明提供的技術方案，所述杜仲葉中提取綠原酸的方法包括如下 步驟：

1.1.1粉碎：將新鮮或干燥的杜仲葉粉碎，過80目篩，得到杜仲葉粉末；

1.1.2酶處理：在杜仲葉粉末中添加活力為500～1000U/g的植物纖維素酶 并放入密閉容器中，植物纖維素酶的添加量為杜仲葉粉末重量的0.4％～0.6％ 倍，再在密閉容器中加入pH4～5的去離子水并攪拌均勻，去離子水的加入量 為杜仲葉粉末重量的8～12倍，控制混合物的溫度為35～50℃，恒溫浸泡20 小時以上；

1.1.3超聲波處理：將酶處理后的混合物在常溫、超聲波頻率為 20～100KHz條件下波處理20～40min；

1.1.4過濾：將超聲波處理后的混合物用高速離心機過濾或者用板框壓濾 機在0.1～0.4Mpa的壓力范圍內壓濾出濾液；

1.1.5提取：過濾后的濾渣用濾渣重量8～12倍的、50～80℃的去離子水強 制回流0.5～1小時，重復提取1～3次得到提取液；