[發(fā)明專利]小麥抗條銹多基因聚合的花培育種新方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910022805.5
• 申請日: 2009-06-03
• 公開（公告）號: CN101558735A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳耀鋒;陳鑫;李春蓮;郭東偉;朱曉娜;白延紅;呂瑞華;李得孝;胡甘;曹婷
• 申請（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號: A01H1/00
• 分類號: A01H1/00;A01H1/04;A01H1/02;A01H1/08;A01H4/00
• 代理公司: 西安恒泰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 李鄭建

1.一種小麥抗條銹多基因聚合的花培育種方法，其特征在于，包括下列步驟：

1)選擇抗31號小種的千斤早、抗32號小種的花育888和抗水源14號小種的WT212作為育種親本材料；

2)用育種親本材料抗31號小種的千斤早、抗32號小種的花育888和抗水源14號小種的WT212進(jìn)行雜交和復(fù)交，獲得多基因聚合的復(fù)交后代；

3)種植復(fù)交后代，取小麥花粉細(xì)胞發(fā)育到單核中期一單核靠邊期的小麥幼穗，經(jīng)75％乙醇表面消毒后，剝?nèi)』ㄋ幗M織到接種小麥花藥培養(yǎng)一步成苗培養(yǎng)基上，于25℃～27℃條件下遮光培養(yǎng)；一步成苗培養(yǎng)基是以通用培養(yǎng)基W₁₄為基礎(chǔ)，添加以下物質(zhì)：6-呋喃基氨基嘌呤：1.5mg/L，α-奈乙酸：0.5mg/L，鹽酸硫胺素：8mg/L，酪蛋白：500mg/L，生物素：0.5mg/L，谷氨酰胺：5mg/L，蔗糖：60000mg/L；麥芽糖：40000mg/L，瓊脂粉：5000mg/L；調(diào)整一步成苗培養(yǎng)基pH值為5.6；

4)待培養(yǎng)的花藥組織出現(xiàn)肉眼可見的愈傷組織時，置于1500Lx光照條件下培養(yǎng)一周，一周后，將光照強(qiáng)度增加到3000Lx～4000Lx，培養(yǎng)溫度為25℃～27℃，連續(xù)培養(yǎng)兩周，即可產(chǎn)生根、苗健壯的花粉植株；

5)根、苗健壯的花粉植株及時移栽到營養(yǎng)缽中，于15℃左右、1500Lx光照條件下緩苗，待完全緩苗且根系進(jìn)一步生長后，用含有0.05％的秋水仙素和1.5％的二甲基亞砜的染色體加倍液注射分蘗節(jié)，對花粉植株進(jìn)行染色體加倍，注射在清晨8～10時進(jìn)行，共三次，每隔一天注射一次，每次用量25μL，花粉植株經(jīng)染色體加倍后得到加倍單倍體個體；

6)加倍單倍體個體經(jīng)自交后，育成穩(wěn)定的加倍單倍體系；

7)用條中31號小種、32號小種和水源14號小種條銹病菌流行小種分別對每個加倍單倍體系接種鑒定苗期和成株期的條銹病單小種抗性；

8)在苗期和成株期均同時抗條中31號小種、32號小種和水源14號小種3個條銹病菌流行小種的加倍單倍體系，即為聚合有3個抗條銹基因的抗條銹新類型或新品系。