[發明專利]一種細胞特異性ndrg2基因表達下調的載體

無效

• 申請號: 200910022351.1
• 申請日: 2009-05-05
• 公開（公告）號: CN101570762A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發明（設計）人: 劉新平;吳有盛;藥立波
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司
• 代理人: 張震國

技術領域

本發明屬于II型糖尿病相關基因功能技術領域，涉及II型糖尿病相關基因ndrg2的基因功能研究，特別涉及一種細胞特異性ndrg2基因表達下調的載體。

背景技術

ndrg2及其在組織細胞特異性的表達

人的ndrg2基因(N-Myc?Downsteam-Regulated?Gene)是鄧燕春等發現并克隆到的一個在腫瘤細胞中低表達的新基因(鄧燕春，藥立波，劉新平等.一種含有ACP樣結構域新基因的發現生物化學與生物物理進展.2001，28(1)：72-76)，由于該基因在結構上與已經發現的N-myc下游調節基因ndrg1(N-myc?down-stream?regulated?gene?1)具有較高的同源性，故將其命名為ndrg2。該基因cDNA全長2024bp，編碼357個氨基酸，染色體定位于14q12.1，具有16個外顯子15個內含子，其GenBank登錄號為AF159092。

劉新平等用免疫組化的方法對小鼠胚胎組織和成體組織以及人體的某些組織進行了系統性的研究，以明確ndrg2基因的表達譜(Hu?XL，Liu?XP，DengYCh，et?al.Expression?analysis?of?NDRG2?gene?in?mouse?embryonic?and?adulttissues.Cell?Tissue?Res.2006，325(1)：67-76)，發現ndrg2是小鼠胚胎組織分化相關基因，隨著胚胎發育ndrg2的表達水平逐漸增高，特別表現在骨骼肌、心肌、腦、腎和胰腺組織，在成體動物中ndrg2的表達仍然表現出這些組織的特異性。特別引人注意的是：ndrg2表達在胰腺的胰島β細胞，而胰島的α細胞和PP細胞不表達。這種在胰島β細胞的特異性表達提示ndrg2與胰島β細胞中的特殊功能有關。

ndrg2可能是胰島素受體介導的信號轉導通路中的新分子

胰島β細胞功能障礙和外周組織胰島素抵抗是II型糖尿病發病的重要特征，經典理論認為在II型糖尿病中胰島素作用障礙主要是由于骨骼肌、脂肪、肝臟等組織的胰島素依賴性葡萄糖攝取及利用障礙，即所謂的胰島素外周抵抗；而胰島β細胞功能障礙是由于葡萄糖感知和胰島素分泌之間的聯系受損所致(Kitamura?T，Kido?Y，Nef?S，Merenmies?J，Parada?LF，Accili?D.PreservedPancreatic?Beta-cell?development?and?function?in?mice?lacking?the?insulinreceptor?related?receptor.Mol?cell?Biol?2001?Aug：21(16)：5624-30)，而目前對胰島素外周組織胰島素抵抗和胰島β細胞功能缺陷之間的關系所知甚少。近年來的研究已證實，胰島β細胞上也存在胰島素受體以及胰島素受體底物，即胰島β細胞中也存在胰島素刺激的信號轉導通路。Kitamura?T發現胰島β細胞胰島素受體基因敲除的小鼠出現β細胞對葡萄糖刺激的第一相胰島素分泌減少80％，糖耐量受損等II型糖尿病的某些特征，直接證明了β細胞胰島素受體在維持血糖穩定方面的重要作用(Nadeeja?Wijesekara，Daniel?Konrad，Mohamed?Eweida，Muscle-Specific?Pten?Deletion?Protects?against?InsulinResistance?and?Diabetes.Molecular?and?Cellular?Biology，February?2005，Vol.25，No.3，1135-1145)。

但是除了β細胞胰島素受體缺陷外，由β細胞胰島素受體介導的信號轉導通路的障礙有可能導致β細胞自身胰島素抵抗而又加重了胰島素分泌減少，進而造成惡性循環。外周組織中胰島素受體介導的信號轉導途徑的研究表明，胰島素首先結合酪氨酸激酶受體，使其B亞基磷酸化被激活之后，再激活胰島素受體底物IRS-1或IRS-2，然后激活PI3K，PI3K再激活PDK、Akt/PKC，促進Glut4的轉位和葡萄糖的轉運。但只有PI3K、Akt的激活還不足以引起Glut4轉位達到最高水平，提示其中還有未知的分子在起作用。