[發明專利]中藥滇黃芩的一種器官發生方法

無效

• 申請號: 200910022196.3
• 申請日: 2009-04-24
• 公開（公告）號: CN101536672A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 步懷宇;岑舉人;王英娟;趙宇瑋;賈敬芬
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司
• 代理人: 謝 鋼

技術領域

本發明涉及中藥滇黃芩的一種器官發生方法，屬于生物組培育苗技術領域。

背景技術

中藥滇黃芩為唇形科黃芩屬(Scutellaria)植物滇黃芩(Scutellaria?amoena C.H.Wright)的根，國家三級重點保護野生藥材，是西南地區藥用黃芩的主流 品種，主要用于治療各種炎癥、以及胃痙攣和解除烏頭中毒引起的多種中樞神 經癥狀，藥用歷史悠久，現收載于《云南省藥品標準》。

滇黃芩主要含：黃芩素(baicalein)，漢黃芩素(wogonin)，黃芩苷(baicalin)， 漢黃芩苷(wogonoside)及31種黃酮類化合物。藥理研究證明黃酮類化合物是黃芩 屬藥用植物的主要有效成分，其中含量較高并具有明顯藥理作用的是黃芩苷、 黃芩素、漢黃芩苷和漢黃芩素。4種成分均有抗氧化清除自由基的作用。黃芩素 是其中已知主要成分中最強的自由基清除劑。黃芩苷與黃芩素對人免疫缺陷病 毒(HIV)逆轉錄酶的活性和成人白血病病毒(MLV)逆轉錄酶有抑制作用倍受人 們關注。趙晶(趙晶.兩種抗人免疫缺陷病毒天然產物結構修飾的研究.北京協 和醫學院，1998)研究發現，黃芩素抑制HIV-RT活性較黃芩苷強。黃芩素、黃 芩苷和漢黃芩苷有強烈的抗炎活性，其中黃芩素和黃芩苷的作用較強；黃芩苷 對臨床眼科常見的多種細菌均有不同程度的抑菌作用。此外，研究表明黃芩苷 具有一定的免疫調節功能(孔祥鶴，魏朔南，滇黃芩的研究進展及作為黃芩藥用 的探討，中國野生植物資源，2008，27(6)：8-11)。

近年來對中國藥典收錄的正品黃芩及其有效成分藥理學特性的研究日趨深 入。但相關研究報道多是正品黃芩，其他種類黃芩的研究報道很少。藥典以黃 芩中具有明顯藥理作用的黃芩苷的含量作為檢測黃芩的質量標準。滇黃芩中黃 芩苷含量經HPLC測定為17.90％，高于黃芩的13.16％(劉美蘭，楊立新，萬元浩， 左風，RP-HPLC法測定7種藥用黃芩中黃芩苷和漢黃芩苷的含量，藥物分析雜 志，2002，22(2)：102-108)，因此，滇黃芩是高質量的黃芩替代品，具有較大的藥 用價值及開發潛力。目前滇黃芩以野生資源為主，因種子直播后出苗不齊，未 能形成規模化種植(孔祥鶴，魏朔南，滇黃芩的研究進展及作為黃芩藥用的探討， 中國野生植物資源，2008，27(6)：8-11)。植物組織培養技術在保護藥用植物野生資 源、生產藥物有效成分方面發揮了重要的作用。趙振玲等((趙振玲，劉其寧，肖 植文，吳學英，杜剛，滇黃芩體胚誘導與植株再生，西南農業學報，2006，19(4)： 714-718)和李婭瓊等(李婭瓊，游春，楊冠，滇黃芩快速繁殖研究，中藥材，2007， 30(7)：761-762)曾分別報道過滇黃芩體胚誘導再生植株和組培快繁，但未見滇黃 芩器官發生途徑再生植株的報道。本發明以滇黃芩不帶腋芽莖段為材料，建立 離體再生體系，克服了滇黃芩種子直播后出苗不齊，未能形成規模化種植的缺 點，實現了滇黃芩組培途徑的多樣化，能在短期內生產出大量滇黃芩組培苗， 滿足工廠化生產的需求。

發明內容

本發明的目的是提供一種滇黃芩器官發生的方法，以不帶腋芽莖段為外植 體，經誘導愈傷、分化叢生芽、繼代及植株再生的步驟，快速獲得大量遺傳穩 定的組培苗，克服了滇黃芩種子直播后出苗不齊，未能形成規模化種植的缺點， 實現了滇黃芩組培途徑的多樣化，能在短期內生產出大量滇黃芩組培苗，滿足 工廠化生產的需求。

本發明實現過程如下：

一種滇黃芩器官發生方法，包括如下步驟：

(1)愈傷組織誘導：將莖切成段接種于愈傷誘導培養基MSP1上誘導愈傷組 織；

(2)分化叢生芽：將生長旺盛的愈傷組織轉移到分化培養基MSP2誘導芽的 分化；

(3)繼代及植株再生：將組培芽苗接種于生根培養基MSP3生根；

上述步驟中培養基組分及含量配比如下：

愈傷誘導培養基MSP1：

MS培養基

6-BA????????????????2mg/L

NAA?????????????????0.5mg/L

蔗糖????????????????30g/L

瓊脂????????????????7g/L

pH??????????????????5.8-6.2

分化培養基MSP2：

MS培養基