[發明專利]一種多粘菌素衍生物及其制備方法

無效

• 申請號: 200910020407.X
• 申請日: 2009-04-03
• 公開（公告）號: CN101851270A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 梁浩;滕峰
• 申請（專利權）人: 梁浩;滕峰
• 主分類號: C07K7/02
• 分類號: C07K7/02;C12P21/06;C07K1/107;A61P31/04
• 代理公司: 威海科星專利事務所 37202
• 代理人: 于濤

技術領域

本發明涉及一種多粘菌素衍生物及其制備方法。

背景技術

多粘菌素(polymyxins)是多粘類芽孢桿菌產生的一類堿性線環狀陽離子多肽抗生素，含有一個親水的環肽頭部和一個疏水的脂肪酸尾。根據結構差異將其分為多粘菌素A、B、C、D和E等組分，分子量都在1200D左右。多粘菌素(polymyxins)A～E具有相似的抗菌譜，對多種革蘭氏陰性菌具有強烈的殺菌作用。研究表明，多粘菌素(polymyxins)可破壞革蘭氏陰性細菌細胞外膜和細胞質膜的通透性，致使胞內物質泄漏從而起到殺菌作用。另外，多粘菌素B(polymyxinsB，PMB)不僅對多種革蘭氏陰性細菌具有殺菌作用，而且對如革蘭氏陰性菌的內毒素(LPS)具有明顯的拮抗作用。多粘菌素B具有潛在的腎毒性和神經毒性，一度限制了它在臨床上的應用。但是，由于臨床上對多藥耐藥(multidrug-resistance，MDR)革蘭氏陰性桿菌感染缺乏有效的治療手段，近年來人們開始重新關注多粘菌素B的臨床使用。

發明內容

本發明采用可控酶解技術將多粘菌素B的N末端脂肪酸鏈和一個二氨基丁酸殘基切掉，然后應用選擇性化學修飾技術，引入新的化學基團，制備出一種多粘菌素衍生物。該衍生物有效的降低了多粘菌素B原有的腎毒性，且有效的提高了抗菌活性，完全可開發成新型抗生素應用于臨床。

本發明所述的多粘菌素衍生物結構圖如下。

其中，R₁與R₂為直鏈飽和烷基，分子式為-C_nH_(2n+1)，其中n≥5且＜10；R₃的分子式為-C_mH_2m-，其中m≥0且＜4。

本發明所述的多粘菌素衍生物，其最佳實施例中，R₁與R₂的n＝5，R₃的m＝0。

本發明所述的多粘菌素衍生物，其最佳實施例的分子式為C₆₄H₁₀₄N₁₆O₁₄。

本發明所述的多粘菌素衍生物，其最佳實施例的名稱為：N，N’-(5-((2S，3R)-1-((S)-4-氨基-1-氧代-1-((3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S)-6，9，18-三(2-氨乙基)-15-苯甲基-3-((R)-1-羥乙基)-12-異丁基-2，5，8，11，14，17，20-七氧-1，4，7，10，13，16，19-七氮雜環二十三烷-21-基氨基)丁烷-2-基氨基)-3-羥基-1-氧代丁基-2-基氨基甲酰基)-1，3-亞苯基)二庚烷酰胺。

本發明所述的多粘菌素衍生物，其最佳實施例的英文名稱為：N，N’-(5-((2S，3R)-1-((S)-4-amino-1-oxo-1-((3S，6S，9S，12S，15R，18S，21S)-6，9，18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-((R)-1-hydroxyethyl)-12-isobutyl-2，5，8，11，14，17，20-heptaoxo-1，4，7，10，13，16，19-heptaazacyclotricosan-21-ylamino)butan-2-ylamino)-3-hydroxy-1-oxobutan-2-ylcarbamoyl)-1，3-phenylene)diheptanamide。

本發明所述的多粘菌素衍生物，其最佳實施例的結構圖如下。

本發明所述的多粘菌素衍生物是通過以下技術方案制備的。

1.多粘菌素B的酶解

(1)取一定量硫酸多粘菌素B溶于0.07M的磷酸緩沖液(pH?7.0)中；

(2)將酰氨鍵水解酶溶于0.07M的磷酸緩沖液(pH?7.0)中，與上述硫酸多粘菌素B溶液混合；

(3)加入二硫蘇糖醇；

(4)37℃溫和混勻24小時后，短時間回流加熱以滅活酶；

(5)冷卻后過濾去除變性酶，用6M的HCl調節pH至2.0；

(6)用正丁醇萃取四次，將水相用6M?NaOH調節pH至8.5；

(7)再用正丁醇萃取，將水相用6M的HCl調節pH至5.1；

(8)將水相減壓濃縮，使用Sephadex?G-10脫鹽柱脫鹽；

(9)凍干后，重溶于0.005M的醋酸銨(pH?5.1)溶液，上樣于CM-52陽離子交換層析柱；