[發明專利]一種分離生姜精油中烯類有效成分的方法

無效

• 申請號: 200910018582.5
• 申請日: 2009-09-24
• 公開（公告）號: CN101665401A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發明（設計）人: 杜愛玲;賈雁高;杜愛琴;王艷
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C07C13/21
• 分類號: C07C13/21;C07C13/23;C07C7/12;B01D15/08;A61K31/015;A61P15/00
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司
• 代理人: 王緒銀

一、技術領域

本發明涉及一種天然活性產物的分離方法，尤其是一種柱層析分離生姜精油中多種烯類有 效成分的方法。

二、技術背景

生姜精油是從姜科植物姜Zingiber?officinale?Rosc.的新鮮根莖中采用水蒸氣蒸餾、壓榨、 超臨界二氧化碳萃取等方法得到的揮發性組分，為棕色油狀液體，具有生姜的濃郁香味和辛辣 味，早期主要用于食品及飲料的加香調味劑，同時也是一種重要的香精原料，現在其藥用價值 逐步受到重視。

生姜精油中主要含有烯類和酚類兩大類成分，烯類包括姜烯、α-姜黃烯、β-沒藥烯、β-水 芹烯、β-倍半水芹烯等成分，酚類也包括多種成分。各成分均具有一定的生物活性應用價值， 例如姜烯是生姜精油的主要成分之一，具有抗病毒、抗潰瘍、抗生育等多種活性；α-姜黃烯和 β-沒藥烯均有良好的抗生育活性；β-水芹烯是一種香料和香料中間體，也是天然的殺蟲劑；姜 酚具有抗氧化、抗腫瘤、防治心血管疾病等多種用途。鑒于生姜精油中各種化學成分分別具有 不同的藥用或其他作用，將它們進行精細分離是本領域研究的趨勢，所獲分離物具有廣闊的應 用前景。

目前，國內外關于生姜精油的研究，主要集中在生姜精油組成分析和姜酚的分離兩方面， 而對生姜精油中烯類成分分離的研究較少。中國專利CN1251367A公開了一種超臨界二氧化碳 萃取分離生姜中有效成分的方法，從生姜中分離得到生姜油樹脂和生姜精油兩種成分復雜的混 合物(生姜精油中已鑒定的組分有約30多種，姜油樹脂中已鑒定的組分約40多種)。中國專 利CN1762956A公開了一種超臨界柱層析制備總姜酚的方法，但未提及生姜精油中的烯類成 分。美國的Jocelyn?G.Millar發表了“從生姜精油中快速分離姜烯”(Jocelyn?G.Millar.Rapid?and Simple?Isolation?of?Zingiberene?from?Ginger?Essential?Oil[J].J.Nat.Prod.1998，61，1025-1026)的 論文，文中敘述：首先將生姜精油進行Kugelrohr蒸餾(微量旋轉蒸餾)，取主要含有倍半萜烯 的餾分，加入親雙烯體物質，使其與含有同環共軛雙烯的姜烯發生Diels-Alder加合反應，加 合物濃縮后采用閃式色譜法精制，之后在KOH的乙醇溶液中還原姜烯，再利用硅膠G柱去除 痕量的苯胺，最終可得到純度達99％的姜烯(氣質分析)。該法步驟多，成本高，在反應及后 續處理過程中加入了較多的化學試劑。此方法有較強的選擇性，只針對姜烯設計工藝路線，是 適用于實驗室制備姜烯標準樣品的方法。但至今姜烯標準樣品未見商品化。總結現有文獻，尚 未見有關生姜精油或姜油樹脂中多種烯類物質分離的報道，也未見有產業化前景的任何一種烯 類成分分離工藝的報道。因而，有必要對生姜精油中烯類有效組分的分離做進一步研究。

層析法是利用混合物中各組分物理化學性質的差異(如吸附力、分子形狀及大小、分子親 和力、分配系數等)，使各組分在兩相(一相為固定的，稱為固定相；另一相流過固定相，稱為 流動相)中的分布程度不同，從而使各組分以不同的速度移動而達到分離的目的。硅膠柱層析 法是根據不同物質由于吸附、溶解性質的不同，在硅膠固定相和洗脫劑流動相中的分配系數不 同，從而達到分離純化的目的，具有分離速度快、效率高、分離效果明顯等特點，可應用于生 物活性物質的分離。

三、發明內容

本發明的目的是提供一種通過一次分離生姜精油獲得β-水芹烯、姜烯、α-姜黃烯等烯類有 效成分的工藝。

本發明的基本構思是采用柱層析，固定相為層析硅膠，流動相為混合洗脫劑，生姜精油置 于層析柱頂端，洗脫劑洗脫，依次收集洗脫液后進行濃縮，得到含有不同有效成分的濃縮產物。 方法步驟為：

1、取生姜精油，加無水乙醇溶解，再加入粒度48-75μm的層析硅膠，攪拌均勻后去除溶 劑，得到吸附有生姜精油的硅膠，生姜精油、無水乙醇與層析硅膠的質量比為1∶2-5∶1-5；

2、另取層析硅膠裝入層析柱中，層析硅膠與生姜精油的質量比為20-50∶1，再將吸附有 生姜精油的硅膠置于層析柱頂端，采用乙醚與正己烷或石油醚的混合洗脫劑進行洗脫，混合洗 脫劑的體積比為2-5∶98-95，依次收集含有β-水芹烯、姜烯、α-姜黃烯和β-沒藥烯的三段洗脫 液；

3、將三段洗脫液分別濃縮，獲得濃縮產物。