[發(fā)明專利]體內(nèi)誘導(dǎo)刺參產(chǎn)卵的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910012325.0
• 申請(qǐng)日: 2009-07-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101595847A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋堅(jiān);龐振國(guó);常亞青;趙沖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連水產(chǎn)學(xué)院
• 主分類號(hào): A01K61/00
• 分類號(hào): A01K61/00
• 代理公司: 大連非凡專利事務(wù)所
• 代理人: 閃紅霞

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種體內(nèi)誘導(dǎo)刺參產(chǎn)卵方法，尤其是一種操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短， 同步產(chǎn)卵且卵子排放量大、質(zhì)量好，可極大提高催產(chǎn)效率、受精率及孵化率的 體內(nèi)誘導(dǎo)刺參產(chǎn)卵的方法。

背景技術(shù)：

海參做為我國(guó)和東南亞等太平洋和西印度洋沿岸國(guó)家人們餐桌上的佳肴美 昧早已聞名于世，特別是世界華人一直有吃海參“食補(bǔ)”的習(xí)慣，如今海參因 具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值已越來(lái)越受人們的青睞。需求的增加導(dǎo)致采捕強(qiáng)度增大， 造成我國(guó)自然生長(zhǎng)的刺參資源量和產(chǎn)量急劇下降，而刺參養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)隨之迅猛發(fā) 展起來(lái)。刺參增養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展導(dǎo)致苗種需求量增加，然而現(xiàn)有刺參產(chǎn)卵效率卻 一直遏制苗種產(chǎn)量，直接影響了刺參養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

目前，海參產(chǎn)卵主要是通過(guò)自然產(chǎn)卵和人工刺激誘導(dǎo)產(chǎn)卵兩個(gè)途徑。自然 產(chǎn)卵要求親參性腺發(fā)育充分成熟，其產(chǎn)卵時(shí)間和產(chǎn)卵量不能人為控制，常因傍 晚或夜間產(chǎn)卵、排精、產(chǎn)卵量過(guò)大、精液過(guò)多等原因而造成水質(zhì)敗壞，繼而導(dǎo) 致受精卵大量解體的現(xiàn)象。人工刺激誘導(dǎo)產(chǎn)卵最大的優(yōu)點(diǎn)是能夠人為控制刺參 的產(chǎn)卵時(shí)間和產(chǎn)卵量，避免自然產(chǎn)卵所存在的水質(zhì)敗壞等問(wèn)題，但是現(xiàn)有的人 工刺激誘導(dǎo)產(chǎn)卵方法還是存在著不同程度的問(wèn)題，仍不能最大程度滿足刺參苗 種生產(chǎn)的需要。

常用的人工刺激誘導(dǎo)產(chǎn)卵分為體外及體內(nèi)誘導(dǎo)兩種，體外誘導(dǎo)是通過(guò)溫差 法和陰干流水等刺激的方法，但誘導(dǎo)效果不穩(wěn)定，海參產(chǎn)卵量少(每只雌參產(chǎn) 卵量一般在100萬(wàn)粒以下)，約占總懷卵量的20％左右，往往需要隔天多次催 產(chǎn)才能滿足生產(chǎn)的需要，勞動(dòng)強(qiáng)度高、育苗時(shí)間長(zhǎng)，否則只能增加種參數(shù)量， 加大了育苗成本。體內(nèi)誘導(dǎo)有單純使用KCl注射催產(chǎn)的方法，此方法不但同自 然產(chǎn)卵一樣，存在著對(duì)親參的性腺成熟度要求高、產(chǎn)卵量極少的問(wèn)題，而且因 注射量要求0.5mol/L、1～2ml，很容易引起親參排出包括性腺在內(nèi)的內(nèi)臟，因此 不能應(yīng)用于刺參苗種的生產(chǎn)上。還有一種體內(nèi)誘導(dǎo)的方法，既是文獻(xiàn)(Develop- mental?biology，326(2009)：169-175)關(guān)于五肽NGIWY酰胺及其衍生物NGLWY 酰胺的報(bào)道(Asn-Gly-Leu-Trp-Tyr-NH2)。文獻(xiàn)雖然指出體內(nèi)注射NGLWY酰 胺能夠誘導(dǎo)刺參精卵排放并公開(kāi)了每個(gè)個(gè)體的注射量為0.1％(v/w)、最佳濃 度為1nmol/L，但經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明：?jiǎn)为?dú)注射NGLWY產(chǎn)卵量少，如平均體重為210 克的成熟親參，平均產(chǎn)卵量只有43萬(wàn)粒，浮游幼體期間成活率只有20～50％，稚 參變態(tài)率只有15～30％。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述技術(shù)問(wèn)題，提供一種操作簡(jiǎn)單， 耗時(shí)短，同步產(chǎn)卵且卵子排放量大、質(zhì)量好，可極大提高催產(chǎn)效率、受精率及 孵化率的體內(nèi)誘導(dǎo)刺參產(chǎn)卵的方法。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：一種體內(nèi)誘導(dǎo)刺參產(chǎn)卵的方法，其特征在于按 如下步驟進(jìn)行：

a.配制催產(chǎn)劑

將NGLWY酰胺溶于超純水中配置成1μmol/L的母液，然后將母液溶于 0.5mol/L的KCl海水溶液中，制成1nmol/L的催產(chǎn)劑；

b.選取親參

選取體重至少200克的性腺成熟親參；

c.注射催產(chǎn)劑

將體積與親參體重比為0.1％ml/g且小于0.3ml的催產(chǎn)劑從刺參背部注入體 腔進(jìn)行體內(nèi)誘導(dǎo)；

d.收集精卵。

本發(fā)明是將NGLWY酰胺和KCl的混合溶液作為人工催產(chǎn)劑對(duì)刺參進(jìn)行體 內(nèi)注射催產(chǎn)。NGLWY酰胺和KCl的合理配伍、相互作用，直接作用于刺參性 腺，誘導(dǎo)刺參卵母細(xì)胞成熟和脫濾泡，一次催產(chǎn)基本保證全部個(gè)體都排放精卵， 催產(chǎn)率達(dá)到90％以上。其用量可保證親身不排臟且排卵率大大提高，平均產(chǎn)卵 量可提高到400萬(wàn)粒，達(dá)到了總懷卵量的70％以上，極大的提高了親參利用率， 即避免了單獨(dú)注射KCl所存在的引用量大引起親參排臟的問(wèn)題，也解決了單獨(dú) 使用NGLWY酰胺所存在的產(chǎn)卵量小的問(wèn)題，具有操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、成本低 等優(yōu)點(diǎn)。卵子同步排放且質(zhì)量好，直接提高了受精率和孵化率(均在98％以上)， 浮游幼體期間成活率達(dá)到50～90％，稚參變態(tài)率達(dá)到40～80％，大大提高苗種產(chǎn) 量。本發(fā)明所使用的催產(chǎn)劑無(wú)毒副作用且所需劑量少，催產(chǎn)后的親參仍可正常 養(yǎng)殖、生長(zhǎng)，進(jìn)一步降低了苗種培育成本，增加了企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。

具體實(shí)施方式：

實(shí)施例1：

a.配制催產(chǎn)劑