[發(fā)明專利]石莼目綠藻無(wú)性繁殖系育苗方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910011689.7
• 申請(qǐng)日: 2009-05-22
• 公開（公告）號(hào): CN101558739A
• 公開（公告）日: 2009-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邵魁雙;鞏寧;閆啟侖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家海洋環(huán)境監(jiān)測(cè)中心
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 李 猛

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種通過海藻組織培養(yǎng)大量生產(chǎn)石莼目綠藻無(wú)性繁殖系幼苗的 方法。

背景技術(shù)

石莼目藻類包括袋礁膜、滸苔、孔石莼等經(jīng)濟(jì)種類，藻體內(nèi)含有豐富的豐富 的蛋白質(zhì)及各種氨基酸，維生素，膳食纖維、微量元素等，具有降血壓、抗腫 瘤、治療便秘等功效，深受日本及東南亞一些國(guó)家歡迎。石莼目藻體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單， 一層或兩層細(xì)胞，外形為葉狀體或管狀體，該目藻類適應(yīng)性強(qiáng)，廣溫廣鹽，尤 其適宜在河口等富營(yíng)養(yǎng)化海區(qū)生長(zhǎng)。因此，開展石莼目海藻的栽培，不僅可以 帶來(lái)可觀的經(jīng)濟(jì)效益，而且具有良好的生態(tài)效益。

我國(guó)目前還沒有經(jīng)濟(jì)綠藻進(jìn)入規(guī)模化養(yǎng)殖階段，日本已經(jīng)開展了礁膜和滸苔 的人工育苗和規(guī)模化養(yǎng)殖，其苗種生產(chǎn)是利用綠藻的有性生殖特性進(jìn)行的，然 而其存在生產(chǎn)周期長(zhǎng)，供苗無(wú)保證的不足。

目前，關(guān)于綠藻酶解育苗的研究取得了一些進(jìn)展，申請(qǐng)?zhí)枮?00510050824.0 的中國(guó)專利申請(qǐng)公開了一種經(jīng)濟(jì)綠藻育苗方法，但酶解育苗過程中使用昂貴的 酶液，在大規(guī)模苗種生產(chǎn)中應(yīng)用，成本過高；而且酶解的材料為野生或養(yǎng)殖的 混雜藻體，遺傳性狀不穩(wěn)定，不利于良種化養(yǎng)殖。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問題，本發(fā)明的目的是建立一種無(wú)性繁殖系苗種生產(chǎn)方法，可用于 石莼目綠藻的規(guī)模化生產(chǎn)，解決育苗生產(chǎn)周期長(zhǎng)、受季節(jié)限制、遺傳性狀不穩(wěn) 定、生產(chǎn)成本過高等問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：將野生藻體離體分割到閾值以下(小于1～5mm)的 片段，進(jìn)行組織培養(yǎng)，待片段細(xì)胞再生出有假根的幼體，將假根及幼體從固著 基上剝離下來(lái)，粉碎后充氣培養(yǎng)，誘導(dǎo)假根及幼體組織進(jìn)行孤雌生殖，釋放不 動(dòng)細(xì)胞并萌發(fā)形成新的植株，達(dá)到無(wú)性繁殖系的擴(kuò)增。

本發(fā)明包括以下步驟：

1)采集性狀較好的未成熟的野生石莼目綠藻藻體，清除附生動(dòng)物和雜藻后， 選擇藻體的中部偏上區(qū)域，切下后，切割成1~5mm以下的片斷；

2)將切割完畢的片段放在PES培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光強(qiáng)：55-95μmol m^-2s^-1，溫度20-25℃；培養(yǎng)時(shí)間一周左右；此時(shí)，片段上的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)過了脫 分化形成游離細(xì)胞或再分化形成游動(dòng)細(xì)胞(兩根鞭毛)的過程，再生形成新的 幼苗，幼苗先形成初生假根，再進(jìn)一步形成盤狀的次生假根；

3)將假根從附著基上剝離下來(lái)，充氣培養(yǎng)，假根上的細(xì)胞能脫落下來(lái)，每 個(gè)脫落的細(xì)胞能再生成新的能附著的幼苗，培養(yǎng)到一定階段，將這些幼體或假 根用粉碎機(jī)粉碎，再充氣培養(yǎng)，通過這種方式可以建立并大量擴(kuò)增無(wú)性繁殖系； 將這些無(wú)性繁殖系噴灑到苗網(wǎng)上，充氣培養(yǎng)，48h后，幼苗附著牢固，就可以實(shí) 現(xiàn)人工育苗，用于規(guī)模化養(yǎng)殖。

所述的1)中的切割過程是通過用手術(shù)刀片切割或組織搗碎機(jī)(轉(zhuǎn)速：0-12000 轉(zhuǎn)/分)對(duì)離體組織進(jìn)行切割的。

所述的1)中所述的切割成1~5mm以下的片斷是指：由于片段的閾值大小與 種類和野生藻體的生長(zhǎng)階段有關(guān)，幼體在1mm以下，未成熟的成體在5mm以下， 片段內(nèi)的細(xì)胞才能出現(xiàn)再生。故而切割片斷的大小一般為幼體在1mm以下，未 成熟的成體在5mm以下。

所述的野生藻體為未成熟的藻體，即藻體上無(wú)有性生殖器官，最好選擇形 態(tài)特征典型的幼體。

有益效果本發(fā)明具有育苗生產(chǎn)周期短、不受季節(jié)限制、遺傳性狀穩(wěn)定、生 產(chǎn)成本低的突出優(yōu)點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)例對(duì)發(fā)明進(jìn)一步進(jìn)行說明。

實(shí)施例1：以緣管滸苔為材料，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的敘述。

1.從海區(qū)采集野生的緣管滸苔藻體，用保溫箱低溫運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，選擇健康 完整的個(gè)體，顯微鏡檢查無(wú)繁殖器官形成，用軟毛筆洗刷藻體表面，清除附著 的雜藻或動(dòng)物。用消毒海水沖洗干凈。