[發明專利]江蘺多糖的制備方法

有效

• 申請號: 200910001265.2
• 申請日: 2009-01-16
• 公開（公告）號: CN101475651A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發明（設計）人: 伍曾利;吳家強;王海生
• 申請（專利權）人: 伍曾利
• 主分類號: C08B37/04
• 分類號: C08B37/04;A61P7/02;A61P31/00;A61P35/00;A61P39/06
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司
• 代理人: 朱建新

技術領域

本發明涉及一種江蘺多糖的制備方法。?

背景技術

江蘺是多年生的大型紅藻，屬于紅藻門，真紅藻綱，杉藻目，江蘺科，江蘺屬，世界江蘺藻種類已報道的約有100種，我國常見的江蘺藻主要有10多種。江蘺藻是我國海南、廣東、浙江、臺灣沿海藻類養殖品種之一，主要作為漁業養殖飼料和生產食品膠原料，對其進行多糖提取分析的研究報道很少。我們經過江蘺藻多糖提取工藝的不斷摸索以及結合以往的一些經驗，發明了江蘺藻多糖。?

江蘺多糖是江蘺藻中的重要生物活性成分之一，多糖是組成生物有機體的一類是組成生物有機體的一類重要生物大分子，作為信息分子廣泛參與細胞間配體與受體的相互識別、細胞內信號轉導等生理過程，與細胞活化、增殖、分化及產生細胞因子等有關。隨著天然藥物研究的不斷深入，人們發現海藻多糖具有抗感染、抗腫瘤、抗凝血、抗輻射、清除氧自由基和延緩衰老的作用。?

發明內容

本發明的目的是提供一種江蘺多糖的制備方法，簡單、安全、環保、低成本。?

為達到上述目的，本發明所提供的技術方案是：一種江蘺多糖的制備方法，包括以下步驟：?

(1)、將采集的江蘺藻沖洗干凈，棄去雜藻和污物，50℃～100℃烘干、粉碎成藻粉；藻粉加入5倍量以上的水進行加熱提取，60℃以上提取30分鐘以上，降至室溫，過濾，得濾液①；?

(2)、在濾液中按每公斤江蘺藻粉加入10～20萬國際單位比活力的裂解酶進行酶解，pH值為6.0～9.0，酶解溫度為30℃～60℃，酶解時間為30～210分鐘；酶解結束后調pH值至3.0～4.0，按每公斤江蘺藻粉加入10～20萬國際單位比活力的蛋白酶進行酶解，攪勻后，維持pH值在3.0～4.0，45℃～50℃的條件酶解，酶解時間為450～510分鐘，酶解結束后加熱至90℃～100℃進行酶滅活，酶滅活時間為5～20分鐘；

(3)、降至室溫，過濾，收集濾液；對濾液調節pH值至5.5～7.0；加入95％的乙醇至乙醇的體積濃度為10％～20％，室溫靜置3.0小時以上；?

(4)、離心，過濾，收集濾液，加入95％乙醇醇沉至乙醇的體積濃度為40％～80％，室溫靜置3.0小時以上；?

(5)、醇沉后的溶液過濾，取沉淀物，沉淀物分別用95％乙醇和丙酮洗2次，真空干燥，即得江蘺多糖。?

該制備方法還包括以下步驟：?

(6)、取步驟(5)所制得的江蘺多糖，加入10倍量以上的水攪拌進行溶解，離心，過濾，取過濾液；?

(7)、將過濾液用DEAE層析柱進行層析分離，用10～30mmol/L，pH5.5～7.0磷酸鹽緩沖液進行洗脫；?

(8)、收集層析分離后的目標物，用截留分子量為5～100KD的超濾膜進行超濾，收集截留液；?

(9)、截留液加入95％乙醇醇沉至乙醇的體積濃度為40％～80％，室溫靜置3.0小時以上；?

(10)、醇沉后的溶液進行離心，過濾，沉淀分別用95％乙醇和丙酮洗2次，進行真空干燥，即得江蘺多糖。?

所述步驟(1)還包括有：濾渣加入4倍重量以上的水進行酶解提取，按每公斤江蘺藻粉加入10～30萬國際單位比活力的復合酶進行酶解，所述復合酶含有重量比為2～1∶1～2的纖維素酶和半纖維素酶；維持pH值在3.0～5.5，酶解溫度為30℃～60℃，時間為60～250分鐘；酶解結束后加熱進行酶滅活，酶滅活溫度為90℃～100℃，酶滅活時間為5～20分鐘，降溫，過濾，得濾液②；所述步驟(2)中裂解酶酶解的為濾液①和濾液②的合并濾液。?

所述步驟(2)中的裂解酶為褐藻膠裂解酶、海藻酸裂解酶、果膠酸裂解酶?或果膠酸酯裂解酶。?

所述的步驟(3)中過濾包括，先用濾布進行粗過濾，再用高速冷凍離心機進行離心，再進行抽濾。?

所述步驟(6)中的過濾過程為：用高速冷凍離心機離心，倒出上清液，收集沉淀至容器中，用95％的乙醇來洗，用抽濾器抽干。?

本發明具有的優點：本發明通過對江蘺藻進行酶解處理，經過分級醇沉及酒精醇沉的方法，第一步分離純化除去其他雜質，再經過DEAE層析柱進行層析分離，然后用分子截留為5～10KD的超濾膜進行超濾，收集截留液，再經過酒精醇沉，第二步分離純化除去其他雜質。這種方法的優點如下：?

1、江蘺藻直接經酶解等生產工藝提取江蘺藻多糖，具有簡單、安全、環保、低成本等優點。?

2、本發明的制備江蘺藻多糖的方法所制備的江蘺藻多糖純度高，收率高，成色好，可大量生產等優點。?