[發(fā)明專利]用于檢測潛血的方法和裝置

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200880123614.1
• 申請日: 2008-09-05
• 公開（公告）號: CN101965515A
• 公開（公告）日: 2011-02-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 約翰·萬;萬志靜
• 申請（專利權(quán)）人: 約翰·萬;萬志靜
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 楊娟奕

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明總體涉及對來自消化(GI)道的樣品的潛血的檢測。尤其是，本發(fā)明提供一種用于檢測轉(zhuǎn)鐵蛋白的裝置和方法，或備選地，使用GI樣品同時檢測血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白的裝置和方法。本發(fā)明的方法為GI出血的診斷提供基礎(chǔ)，并為來自上GI道和下GI道的出血的鑒別診斷提供基礎(chǔ)。

背景技術(shù)

大便潛血(FOB)對于監(jiān)控來自消化(GI)系統(tǒng)的出血是非常好的指示物。由于一些大腸息肉可能需要幾年的轉(zhuǎn)變成結(jié)直腸癌，檢測出血的大腸息肉是一種有效的在早期甄別結(jié)直腸癌的方法。為50歲或更年長的人進行甄別在糞便樣品中的潛血的過程，已經(jīng)將結(jié)直腸癌的發(fā)生率降低了20％，將死亡率降低了30％。

當前可用的FOB測試包括檢測在糞便樣品中的血紅蛋白代謝物的化學(xué)測試。該測試使用可氧化的底物(例如愈創(chuàng)樹脂)，該底物在有過氧化物和血紅蛋白出現(xiàn)時產(chǎn)生有色產(chǎn)物。由于大多數(shù)動物的血紅素分子、植物成分和常見的維生素也能催化過氧化氫反應(yīng)，所以飲食控制對于這種類型的化學(xué)測試的特異性是關(guān)鍵的。嚴格的飲食控制產(chǎn)生了嚴重的患者的遵守問題。平均地說，低于10％的遵守率并不是罕見的。此外，化學(xué)測試一般具有有限的靈敏度。例如，使用愈創(chuàng)樹脂作為底物的FOB測試的測試靈敏度為50μg/ml，而改進的版本的測試靈敏度為20μg/ml。

已開發(fā)了一種對血紅蛋白的三明治免疫測定，與化學(xué)測試相比，其提供更高的測試靈敏度及特異性。對于這種免疫測定，對飲食控制的需要也可以不用。

血紅蛋白是易分解的蛋白；它在人的GI系統(tǒng)中會迅速降解。在收集了糞便樣品之后，在運輸和儲存期間，血紅蛋白也容易遭受降解。所有這些樣品的降解問題都會影響血紅蛋白化驗的測試精度。

轉(zhuǎn)鐵蛋白是另一種用于檢測大便潛血的生物標記。在正常人的血液中，轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白的含量分別是3mg/ml和150mg/ml。另一方面，在糞便樣品中血紅蛋白對轉(zhuǎn)鐵蛋白的比大約是5，這遠低于在血液中的比(大約是50)。這一觀測數(shù)據(jù)表明在GI道中轉(zhuǎn)鐵蛋白大約比血紅蛋白要穩(wěn)定10倍以上。已經(jīng)有報告提出特定疾病可以影響轉(zhuǎn)鐵蛋白在血液和糞便樣品中的水平，影響的程度到了僅基于轉(zhuǎn)鐵蛋白的FOB測試可能產(chǎn)生假陰性結(jié)果。用于檢測血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白兩者的組合測試可以提高測試靈敏度，并且不犧牲測試的特異性。

發(fā)展FOB化驗的另一個挑戰(zhàn)是目前在市場上很少有自動分析儀能處理糞便樣品。因此期望和需要一種快速的現(xiàn)場FOB測試。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種免疫測定方法和裝置，其能夠檢測來自整個GI系統(tǒng)的出血，并且能夠支持對上GI出血和下GI出血的鑒別診斷。本發(fā)明的免疫測定涉及使用GI樣品，對轉(zhuǎn)鐵蛋白的單獨測定，或者備選地，對血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白的同時檢測。

在一個方面中，本發(fā)明提供一種檢測上GI道樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的方法，以幫助診斷來自上GI道的出血。上GI樣品包括嘔吐物或者從例如胃收集到的物質(zhì)。

在另一方面中，本發(fā)明提供一種同時檢測糞便樣品中的血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白的方法，以幫助診斷來自GI道的出血，以及區(qū)分在上GI道的出血和在下GI道的出血。

在一個實施例中，本發(fā)明提供一種用于檢測大便潛血的方法，其檢測在糞便樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白，以及將檢測到的轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白的量與各自的預(yù)定值相比較，從而確定潛血是否出現(xiàn)在所述樣品中。

在特定實施例中，當所述轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白兩者測試都是陽性時，或者換句話說當在糞便樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量高于轉(zhuǎn)鐵蛋白的預(yù)定值并且在樣品中的血紅蛋白的量也高于血紅蛋白的預(yù)定值時，檢測結(jié)果表示出血來自下GI道。

在另一實施例中，當轉(zhuǎn)鐵蛋白測試為陽性而血紅蛋白測試為陰性時，換句話說，當樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量高于轉(zhuǎn)鐵蛋白的預(yù)定值而樣品中的血紅蛋白的量低于血紅蛋白的預(yù)定值時，檢測結(jié)果表示出血來自上GI道。

在又一實施例中，如果使用糞便樣品而轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白兩者的測試均為陰性，這種結(jié)果表示在整個GI道中無出血。

根據(jù)本發(fā)明，可以通過多種化驗來實現(xiàn)對轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白的檢測。在一個實施例中，通過三明治免疫測定實現(xiàn)該檢測，所述三明治免疫測定使用互補的抗-轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體對和互補的抗-血紅蛋白抗體對。

在特定實施例中，使用橫向流動三明治免疫測定裝置實現(xiàn)對轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白的檢測。