[發明專利]抗原組合物及其在核酸的靶向遞送中的應用

有效

• 申請號: 200880113601.6
• 申請日: 2008-08-29
• 公開（公告）號: CN101842490A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 安托萬·努杰姆;喬治·拉詹
• 申請（專利權）人: 威瑞克斯醫藥公司
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;A61K39/385;A61K47/48;A61K48/00;A61P31/12;A61P35/00;A61P37/04;C07K14/02;C07K16/28;C07K19/00;C12N15/11;C12N15/85;A61K31/7088
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 吳貴明;張英

技術領域

本發明涉及用于遞送核酸的組合物。更具體地，提供了用于將核酸進行包封、結合、或以其他方式攜帶和遞送至靶細胞的嵌合抗原。

背景技術

盡管近來在核酸治療劑的鑒定和精制中的進步，但是找到在各種應用中用于這些分子的合適遞送方式已被證實具有挑戰性。此外，雖然期望通過將核酸治療劑定位或靶向至感興趣的組織/細胞來最小化這些昂貴分子的劑量，但是已經考察的許多技術沒有有前景的結果。

RNAi[Fire?A.，et?al(1998)Nature?391：801-11]已作為一種方式出現，用于序列特異性的、posT轉錄基因沉默，其由與該靶向用于沉默的基因同源的短干擾RNA(siRNA)介導。然而，為了有效地用作藥物，siRNA(或它們的較大RNA前體)必須被直接遞送到靶細胞中。siRNA靶向遞送到感興趣的特定細胞中已經成為通過RNAi技術實現體內基因沉默的主要障礙。特異性遞送、劑量減少和最小化毒性都是該領域中重要的未實現的目標。

已經出現潛在的靶向siRNA遞送系統，如抗體介導的遞送和脂質體遞送。抗體介導的siRNA遞送可以在對正常組織具有較小影響的情況下允許siRNA在靶細胞中優先積累，并且已經提出這樣的配體可以進一步結合于遞送試劑如脂質體，以通過受體介導的胞吞作用促進攝入到靶細胞中。

用于將siRNA體內遞送至特定靶細胞的另外的潛在方法利用魚精蛋白的核酸結合性能，聯合抗體介導的遞送的特異性。與抗體片段魚精蛋白融合蛋白復合的siRNA的注射已被用來選擇性地將siRNA遞送到靶細胞中，該靶細胞表達由該抗體識別的細胞表面受體[在Dykxhoorn，D.M.，et?al(2006)Gene?Therapy?13-541-552；SongE.et?al(2005)Nature?Biotech.23(6)：709-717中進行了綜述]。

特定細胞型或靶向器官通常將隨著被遞送的治療劑的類型而改變。例如，樹突細胞在癌癥免疫療法應用中可以是關鍵焦點，因為這些有效的抗原呈遞細胞能夠獨特地誘導免疫性以破壞對癌癥抗原的耐受性。已經提出RNAi(RNA干擾)可以通過靶向樹突細胞中的基因表達而被用于免疫調節[Hill，J.A.，et?al(2003)J.Immunol.171：691-696]。

SOCS-1已表明控制樹突細胞的耐受原(致耐原的，tolerogenic)和免疫原狀態，以及抗原呈遞的程度和由此的適應性免疫(獲得性免疫)的大小[在Yoshimura，A.，et?al(2007)Nature?Rev.Immunol.7：454-465中進行了綜述]。通過siRNA進行的SOCS-1的沉默增強通過樹突細胞的抗原呈遞以及抗原特異性抗腫瘤免疫性，并且可以提供一種破壞宿主耐受性、增強抗原特異性抗腫瘤和抗病毒免疫性、以及增加基于樹突細胞的癌癥疫苗的效力的選擇性方式。在樹突細胞中沉默SOCS-1可以降低細胞對內源性刺激的應答性的閾值，允許體內抗原特異性T細胞的持久激活，并且提高T細胞的抗癌活性。

在體外研究中，當在利用癌抗原接種疫苗之前SOCS-1在樹突細胞中被沉默時，樹突細胞表現出增強的抗原特異性抗腫瘤免疫性[Shen，T.(2004)Nature?Biotech?22(12)：1546-1553]。在小鼠中的體內研究中，SOCS-1的沉默誘導抗-HIV-1CD8+和CD4+T細胞應答以及抗原應答[Song，X-T.et?al(2006)PLoS?Med?3：1-18]。

已經提出siRNA在治療病毒病中的應用。尤其是，慢性病毒病的表現依賴于宿主免疫系統的失效(或回避)。已推測，病毒性基因表達可以通過將病毒特異性siRNA給予受感染的宿主而沉默。

在患有慢性病毒感染或寄生蟲感染(其中有機體在其生命周期期間的某些點停留在宿主細胞內)的受治療者中，抗原由宿主細胞產生并在宿主細胞中表達，并且分泌的抗原存在于循環中。作為一個實例，在慢性人乙肝病毒(HBV)感染的載體的情況下，病毒體、HBV表面抗原、以及核心抗原的替代物(以e-抗原的形式)可以在血液中進行檢測，但明顯地通過宿主免疫系統耐受。

類似地，在癌癥中，腫瘤從免疫監視和攻擊逃脫對于宿主中的腫瘤存活是主要決定因素。對于用于引發或增強針對傳染病或癌癥的免疫應答、或用于破壞對傳染病或癌癥的耐受性的新的治療有效的化合物、組合物和方法存在需要。

發明內容