[發明專利]具有免疫原性的物質

有效

• 申請號: 200880020642.0
• 申請日: 2008-06-18
• 公開（公告）號: CN101952320A
• 公開（公告）日: 2011-01-19
• 發明（設計）人: 曹韞旭
• 申請（專利權）人: 上海澤潤安珂生物制藥有限公司;曹韞旭
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/025;C07K14/35;C07K14/02;C12N7/04;C12N15/62;C12N15/63;A61K39/12;A61P35/00;A61P31/20;A61P17/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 張萍;李連濤

1.一種融合蛋白，包含以下的蛋白：人乳頭瘤病毒E7抗原，病毒衣殼蛋白和分子伴侶蛋白。

2.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的人乳頭瘤病毒E7抗原、病毒衣殼蛋白和分子伴侶蛋白之間，通過化學鍵相連或相互偶聯；所述的化學鍵是共價鍵或非共價鍵。

3.如權利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述的化學鍵是肽鍵。

4.如權利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白從氨基端到羧基端依次包含：人乳頭瘤病毒E7抗原，病毒衣殼蛋白和分子伴侶蛋白。

5.如權利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，在病毒衣殼蛋白和分子伴侶蛋白之間，還包括一連接肽，所述的連接肽上包含至少一個酶切位點。

6.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的病毒衣殼蛋白是乙肝病毒核心抗原。

7.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的分子伴侶蛋白是選自分子伴侶蛋白家族的一種蛋白。

8.如權利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述的分子伴侶蛋白選自：熱休克蛋白65，熱休克蛋白60，熱休克蛋白70，熱休克蛋白90或熱休克蛋白100。

9.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述的人乳頭瘤病毒E7抗原是：(a1)如SEQ?ID?NO：1中第1-98位所示氨基酸序列的蛋白，或由(a1)限定的氨基酸序列經過一個或多個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a1)限定的蛋白相同抗原性的由(a1)衍生的蛋白；或

所述的病毒衣殼蛋白是：(b1)如SEQ?ID?NO：1中第99-283位所示氨基酸序列的蛋白，或由(b1)限定的氨基酸序列經過一個或多個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(b1)限定的蛋白相同功能的由(b1)衍生的蛋白；或

所述的分子伴侶蛋白是：(c1)如SEQ?ID?NO：1中第284-823位所示氨基酸序列的蛋白，或由(c1)限定的氨基酸序列經過一個或多個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(c1)限定的蛋白相同功能的由(c1)衍生的蛋白。

10.權利要求1所述的融合蛋白的用途，用于制備具有免疫原性的大分子。

11.一種核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子編碼權利要求1所述的融合蛋白。

12.一種載體，其特征在于，所述的載體含有權利要求11所述的核酸。

13.一種細胞，其特征在于，所述的細胞含有權利要求12所述的載體或其基因組中整合有權利要求11所述的核酸分子。

14.一種具有免疫原性的大分子，其特征在于，所述的大分子是一種多分子聚合物，該聚合物主要由權利要求1所述的融合蛋白自我裝配而成，其分子量超過1000KD。

15.如權利要求14所述的具有免疫原性的大分子，其特征在于，所述的大分子中還包含：至少一種免疫刺激物。

16.如權利要求15所述的具有免疫原性的大分子，其特征在于，所述的免疫刺激物與所述的具有免疫原性的大分子相偶聯，或被包裝入所述具有免疫原性的大分子；所述的免疫刺激物選自：雙鏈RNA，或非甲基化的CpG-DNA。

17.一種制備權利要求14所述的具有免疫原性的大分子的方法，其特征在于，所述方法包括；

(1)培養權利要求13所述的細胞，從而表達權利要求1所述的融合蛋白；

(2)分離純化(1)獲得的融合蛋白，在一步或多步的分離純化步驟中使用離液劑：和

(3)通過移除離液劑使(2)獲得的融合蛋白自我裝配成所述的具有免疫原性的大分子。

18.如權利要求17所述的方法，其特征在于，所述的離液劑選自：尿素或鹽酸胍。

19.權利要求14所述的大分子的用途，其特征在于，用于制備預防或治療人乳頭瘤病毒感染相關疾病的組合物。

20.如權利要求19所述的用途，其特征在于，所述的疾病選自：腫瘤、宮頸上皮內瘤樣病變、外生殖器疣。