[發(fā)明專利]紅細(xì)胞攜帶的抗原以及抗紅細(xì)胞抗體的檢測(cè)

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200880019293.0
• 申請(qǐng)日: 2008-06-06
• 公開（公告）號(hào): CN101715558A
• 公開（公告）日: 2010-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 弗雷德里克·比菲埃;伊夫·瑞森;埃利亞內(nèi)·里瓦蘭;安帕魯·圣胡安
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 博瑞巴斯德公司
• 主分類號(hào): G01N33/80
• 分類號(hào): G01N33/80;G01N33/543;G01N33/537;G01N33/569
• 代理公司: 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11219
• 代理人: 張穎;樊衛(wèi)民

1.用于鑒定個(gè)體的紅細(xì)胞攜帶的多種抗原性分子，和/或用于鑒定生物樣品中多個(gè)針對(duì)紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子的抗體的體外方法，

所述由紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子由紅細(xì)胞和至少一種其它細(xì)胞群二者都攜帶的、血型分子以外的抗原性分子組成，

所述方法包括

a)通過下列步驟鑒定個(gè)體的紅細(xì)胞攜帶的多種抗原性分子

(i)在允許紅細(xì)胞與抗體結(jié)合并且不產(chǎn)生凝集的條件下，將所述含有紅細(xì)胞的樣品，在單一測(cè)試容器或在幾個(gè)分離的測(cè)試容器中，與多組可辨別的珠子相接觸，每組可辨別的珠子帶有給定的、特異性針對(duì)紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子的抗體，所述抗體在一組珠子與另一組珠子之間不同，所述紅細(xì)胞在與所述的多組珠子進(jìn)行接觸之前或之后被標(biāo)記，

(ii)除去不與所述抗體結(jié)合的紅細(xì)胞，以及

(iii)鑒定與標(biāo)記的紅細(xì)胞結(jié)合的珠子組，從而鑒定由所檢測(cè)的紅細(xì)胞攜帶的抗原；

和/或

b)通過下述步驟鑒定生物樣品中針對(duì)紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子的多種抗體，

(iv)在允許樣品中存在的抗體或活化的血清補(bǔ)體級(jí)份與紅細(xì)胞或紅細(xì)胞膜片段結(jié)合，并且不產(chǎn)生凝集的條件下，將所述樣品，在單一測(cè)試容器或在幾個(gè)分離的測(cè)試容器中，與多組可辨別的珠子相接觸，每組可辨別的珠子攜帶有表型已知的(1)紅細(xì)胞或(2)紅細(xì)胞膜片段，所述已知表型在一組珠子與另一組珠子之間不同，

(v)除去不與所述紅細(xì)胞或所述紅細(xì)胞膜片段結(jié)合的抗體或活化的血清補(bǔ)體級(jí)份，

(vi)對(duì)結(jié)合的抗體和/或結(jié)合的活化血清補(bǔ)體級(jí)份進(jìn)行標(biāo)記，以及

(vii)鑒定與標(biāo)記的抗體或標(biāo)記的活化血清補(bǔ)體級(jí)份結(jié)合的珠子組，從而鑒定存在的、針對(duì)紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子的抗體。

2.權(quán)利要求1的方法，其中按照(a)鑒定抗原和按照(b)鑒定抗體同時(shí)并在同一個(gè)容器中進(jìn)行。

3.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中混合物的分析通過流式細(xì)胞術(shù)來進(jìn)行。

4.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中還包括血紅蛋白的化學(xué)或酶法降解的步驟，例如溶血。

5.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中可辨別的珠子是超順磁性、或磁性、或可磁化的珠子。

6.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中可辨別的珠子發(fā)射發(fā)光或熒光信號(hào)。

7.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中可檢測(cè)地標(biāo)記的紅細(xì)胞用熒光化合物標(biāo)記。

8.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中抗體(根據(jù)b)是通過與帶有熒光、發(fā)光或放射性標(biāo)記物的抗人類球蛋白抗體相接觸來標(biāo)記的。

9.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中活化血清補(bǔ)體級(jí)份是通過與帶有熒光、發(fā)光或放射性標(biāo)記物的抗血清補(bǔ)體級(jí)份抗體相接觸來標(biāo)記的。

10.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中生物樣品選自全血、血漿、血清、血細(xì)胞顆粒或任何其它血液制備物。

11.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中生物樣品源自于具有體內(nèi)被抗體致敏、或包被有血清補(bǔ)體級(jí)份的紅細(xì)胞的個(gè)體。

12.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，還包括對(duì)鑒定到的抗體進(jìn)行定量。

13.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中抗原性分子是HLA系統(tǒng)的分子、被個(gè)體吸收的化學(xué)產(chǎn)品或藥物，或其降解產(chǎn)物。

14.用于執(zhí)行前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的檢測(cè)方法的反應(yīng)物組，包含可辨別的珠子組，每個(gè)珠子帶有至少一種可以被檢測(cè)的具體物理參數(shù)，并且每個(gè)珠子屬于至少兩種不同的組，一組帶有特異性針對(duì)紅細(xì)胞攜帶的抗原性分子的捕獲抗體，另一組攜帶(1)紅細(xì)胞或(2)紅細(xì)胞膜片段。