[發明專利]制備含骨鈣素提取物的方法

無效

• 申請號: 200880014594.4
• 申請日: 2008-03-05
• 公開（公告）號: CN101674839A
• 公開（公告）日: 2010-03-17
• 發明（設計）人: 大野木宏;足立真一;中川一夫;巖元宏毅;加藤郁之進
• 申請（專利權）人: 寶生物工程株式會社
• 主分類號: A61K35/32
• 分類號: A61K35/32;A61K38/00;A61P1/14;A61P19/08
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 李 進;孫秀武

技術領域

[0001]

本發明涉及制備含活性骨鈣素的提取物的方法；由該制備方法得到的提取物；含該提取物的食物或飲料產品、藥物、口腔護理組合物和飼料；和含由骨得到的骨鈣素的生長促進劑。

背景技術

[0002]

活性骨鈣素又稱為含Gla的骨蛋白，為由成骨細胞、骨形成細胞合成的特征性非膠原蛋白，且其存在于細胞外基質中。據報道，活性骨鈣素占骨非膠原蛋白的10-20％。

[0003]

人骨鈣素分子含49個氨基酸，其中分子中的谷氨酸殘基通過依賴維生素K的翻譯后修飾轉化為γ-羧基谷氨酸(Gla)殘基。γ-羧基化骨鈣素分子含3個Gla殘基(在17、21和24位)。活性維生素D促進成骨細胞中γ-羧基化骨鈣素的生物合成。γ-羧基化骨鈣素稱為活性骨鈣素，因為它能夠通過Gla殘基與鈣結合，據報道，由于該功能，所以它涉及骨鈣化。因為一部分骨鈣素分子分泌到血液，所以用血清骨鈣素水平作為骨形成和骨代謝病的指數。

[0004]

在人類中，礦物質的攝取量低于需要量不利于保持好的健康。尤其是，已知缺鈣不僅增加骨病例如骨質疏松的風險，而且還影響肌肉和神經組織的功能。為加強包括鈣在內的礦物質的吸收，對作為礦物質吸收促進劑的Gla的利用進行了研究，Gla對鈣具有親和力；據報道，含Gla的骨鈣素可用作該促進劑的原料(專利文件1)。

[0005]

僅有少數由生物材料制備活性骨鈣素的方法的報道。已有將雞骨中骨鈣素和骨橋蛋白選擇性溶解的方法的報道(非專利文件1)。該文件中公開的方法是用含乙二胺四乙酸(EDTA)的溶劑提取。

[0006]

除上述用含EDTA的溶劑提取的方法外，還已知用酸提取骨中骨鈣素的提取方法；但是，這些方法的提取效率不理想(非專利文件2)。

[0007]

在另一方面，用熱水提取家畜動物骨，提取物用作食物湯和天然調味品的原料。但是，提取后骨殘渣無有效用途；如果再利用它們，它們至多用作肥料。因此，需要骨殘渣的更有效應用。

[0008]

專利文件1：JP?6-70719A

非專利文件1：Calcif.Tissue?Int.，55：230-235(1994)

非專利文件2：Methods?Enzymol.，107：516-544(1984)

發明內容

本發明解決的問題

[0009]

如上所述，需要開發有效利用骨的方法。在提取骨中骨鈣素的常規已知方法中，用生骨作原料，用含EDTA的溶劑或酸性溶劑提取。但是，當用于食品時，EDTA的使用和用量受到限制，因此，在食品制備中EDTA的使用是不適當的。即使引入除去EDTA的步驟來避免該問題，也難以完全除去EDTA。另外，該步驟的引入還會增加生產成本。與用EDTA的方法相比，在使用酸的方法中不可能得到充分的提取效率。另外，關于用生骨為原料，它們的提取物已經用作食品。

[0010]

因此，本發明的目的是有效提取骨中活性骨鈣素，提供適合用作食品的富含活性骨鈣素的提取物。

解決問題的方法

[0011]

在熱處理骨中有用蛋白例如活性形式的骨鈣素，例如用熱水提取的那些的存在在現有技術中尚未發現。本發明發明人通過使用食品添加劑和全面利用食物處理技術對熱處理骨進行各種提取處理。結果，本發明發明人意外地發現，可提取高濃度活性骨鈣素，提取效率良好，且可制備安全性優良和富含活性骨鈣素的提取物。本發明發明人還建立了從未熱處理的生骨提取活性骨鈣素的方法，從而完成本發明，開發由骨得到活性骨鈣素的用途。

[0012]本發明的第一個方面涉及制備含活性骨鈣素的提取物的方法，該方法包括用溶劑從熱處理骨中提取的步驟。在本發明的第一方面的實施方案中，熱處理可以是濕熱處理，用于提取的溶劑可以是酸性或堿性水溶液。熱處理骨的實例包括除去豬骨湯后剩余的煮熟的骨。

[0013]

本發明的第二方面涉及制備含活性骨鈣素的提取物的方法，該方法包括用堿性水溶液從未熱處理骨中溶劑提取的步驟。

在本發明的第一或第二方面的實施方案中，pH8-12的堿性水溶液或碳酸鹽和/或碳酸氫鹽水溶液可用作所述堿性水溶液。該方法還可包括將含活性骨鈣素的提取物脫鹽的步驟。

[0014]

本發明的第三方面涉及用本發明第一或第二方面的方法制備的含活性骨鈣素的提取物。

[0015]