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[發明專利]一種提取大豆種子DNA的方法無效

專利信息
申請號: 201110320948.1 申請日: 2011-10-20
公開(公告)號: CN102344922A 公開(公告)日: 2012-02-08
發明(設計)人: 王存芳;劉天明 申請(專利權)人: 山東輕工業學院
主分類號: C12N15/10 分類號: C12N15/10
代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 代理人: 楊琪
地址: 250353 山東*** 國省代碼: 山東;37
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 提取 大豆 種子 dna 方法
【權利要求書】:

1.一種提取大豆種子DNA的方法,其特征在于,步驟如下:

(1)取適量大豆種子,粉碎,待用;

(2)取0.1g上述粉末,置于1.5ml離心管中,加入100ul?20%的SDS溶液、500ul?CTAB提取緩沖液和4ul蛋白酶K,充分混勻后,放入60~65℃恒溫水浴鍋中消化60min,期間每10min顛倒混勻一次;

(3)加入36ul?5mol/L的KAC,混勻,冰浴30min,10000~12000r/min離心10min;

(4)取上述離心后的上清液,置于另一離心管中,加入等體積的氯仿/異戊醇,輕柔顛倒混勻10min,10000~12000r/min離心10min;

(5)取上述離心后的上清液,沿管壁緩慢旋轉加入等體積-20℃預冷的異丙醇,室溫下沉淀,10000~12000r/min離心3min;

(6)棄去上述離心后的上清液,用500ul?70%乙醇洗滌沉淀3次,即得大豆種子DNA。

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